[發明專利]一種用鴨膽汁中提取的鴨膽酸合成鵝去氧膽酸的方法

在審

• 申請號: 201511000722.8
• 申請日: 2015-12-25
• 公開（公告）號: CN105418716A
• 公開（公告）日: 2016-03-23
• 發明（設計）人: 劉新宇;周虹
• 申請（專利權）人: 成都市新功生物科技有限公司
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00
• 代理公司: 四川省成都市天策商標專利事務所 51213
• 代理人: 劉興亮

技術領域

本發明涉及一種鵝去氧膽酸的制備方法，具體涉及一種用鴨膽汁中提取的鴨膽酸合成鵝去氧膽酸的方法。

背景技術

鵝去氧膽酸(Chenodeoxycholicacid，簡稱CDCA)，是一種天然的膽酸，是1848年首次從鵝膽汁中提取得到的。鵝去氧膽酸具有溶解膽結石的能力和其他藥學功能，是治療膽結石的天然良藥，同時又是合成熊去氧膽酸和其他甾體化合物的原料。

由于鵝去氧膽酸是雞、鴨與鵝等家禽膽汁的主要成分，其可直接從禽類的膽汁中提取而來。但是受技術限制，目前市場上的鵝去氧膽酸產品基本是從雞膽汁中提取得到的。鵝的飼養數量較少，難以應用其膽汁作提取鵝去氧膽酸的原料。鴨的飼養量巨大，與雞膽汁的組成成分相比，鴨膽汁的成分較復雜，不能應用從雞膽汁中提取鵝去氧膽酸的方法提取鴨膽汁中的鵝去氧膽酸。

到目前為止，傳統的從雞、鴨與鵝等的膽汁中提取鵝去氧膽酸工藝包括膽汁皂化、酸化、除醇不溶物、除脂、生成鋇鹽、脫鋇等步驟，工藝過程復雜，收率低，產業化應用困難。或者采用鈣鹽沉淀法，沉淀速度慢，效率低，且雙氧水及活性炭脫色效果也不理想。

發明內容

[要解決的技術問題]

本發明的目的是解決上述現有技術問題，提供一種用鴨膽汁中提取的鴨膽酸合成鵝去氧膽酸的方法。該方法通過從鴨膽汁中提取鴨膽酸粗品，然后將鴨膽酸粗品經甲酯化乙酰化后，利用黃鳴龍還原反應制得鵝去氧膽酸，收率好、純度高；適于產業化應用。

[技術方案]

為了達到上述的技術效果，本發明采取以下技術方案：

一種用鴨膽汁中提取的鴨膽酸合成鵝去氧膽酸的方法，它包括以下步驟：

Ⅰ，鴨膽酸的提取

取新鮮鴨膽汁，皂化、加鹽酸調節pH為2～3酸化后得到黑色膏狀物；然后加入甲醇完全溶解黑色膏狀物并利用石油醚除油脂后，在70℃以下真空濃縮甲醇層得膽汁酸粗品；接著加入乙腈甲醇混合液溶解膽汁酸粗品，并上硅膠柱吸附，梯度洗脫得到所述鴨膽酸粗品；

Ⅱ，鵝去氧膽酸的合成

將步驟Ⅰ得到的鴨膽酸粗品經甲酯化、乙酰化后得到產物A，再經黃鳴龍還原反應得到所述的鵝去氧膽酸粗品；

將該步驟得到的鵝去氧膽酸粗品經氯仿結晶，得到所述鵝去氧膽酸。

根據本發明更進一步的技術方案，在步驟Ⅰ中，所述皂化是按新鮮鴨膽汁與氫氧化鈉的質量比為1：0.3～0.4向新鮮鴨膽汁中加入氫氧化鈉，然后密封升溫至110～125℃，攪拌反應12～14h。

根據本發明更進一步的技術方案，在步驟Ⅰ中，所述利用石油醚除油脂過程重復2～3次。

根據本發明更進一步的技術方案，在步驟Ⅰ中，所述乙腈甲醇混合溶液是將乙腈和甲醇按體積比72：25混合均勻；所述梯度洗脫是用乙腈和甲醇體積比范圍為72：25～60：40的乙腈甲醇混合溶液梯度洗脫。

根據本發明更進一步的技術方案，在步驟Ⅰ中，所述梯度洗脫后用薄層色譜法(TLC)點樣確認分段收集洗脫液得到鴨膽酸粗品。

根據本發明更進一步的技術方案，在步驟Ⅱ中，所述甲酯化是將鴨膽酸粗品加入甲醇溶解后，緩慢加入鴨膽酸粗品質量0.11～0.13倍的質量分數為98％的硫酸，常溫下甲酯化反應4～5h；然后加入氫氧化鈉至反應液pH為6～8，終止甲酯化反應；過濾去除中和產物硫酸鈉，濃縮濾液得到鴨膽酸甲酯化物。

根據本發明更進一步的技術方案，在步驟Ⅱ中，所述乙酰化是向所述鴨膽酸甲酯化物中加入醋酸酐后，在135～145℃下乙酰化反應4～5h，反應完全后，在120℃以下真空濃縮得到產物A。

根據本發明更進一步的技術方案，在步驟Ⅱ中，所述黃鳴龍還原反應是向產物A中加入乙二醇、質量分數為85％的水合肼溶液和氫氧化鉀，然后加熱回流4～5h，得到所述鵝去氧膽酸粗品。

根據本發明更進一步的技術方案，所述產物A、乙二醇、水合肼溶液和氫氧化鉀的質量比為1：3：1：5。

在步驟Ⅰ中，膽汁酸粗品經上硅膠柱梯度洗脫的過程中，還會洗脫出鵝去氧膽酸粗品，該部分粗品可通過氯仿結晶得鵝去氧膽酸精品。

下面將詳細地說明本發明。

本發明通過皂化、酸化、除脂反應后，利用乙腈甲醇混合溶液將得到的膽汁酸粗品過硅膠柱分離純化，通過薄層色譜法(TLC)點樣確認分段收集洗脫液得到鴨膽酸粗品。由于硅膠柱分離純化后，得到的鴨膽酸粗品純度較高，從而保證后續反應得到的鵝去氧膽酸產物的高純度。在加入石油醚除油脂時，通過虹吸分去石油醚層，可濃縮石油醚層回收石油醚，濃縮物為油脂，丟棄。