[發明專利]一種雞馬立克氏病耐熱保護劑活疫苗及其制備方法

有效

• 申請號: 201511000683.1
• 申請日: 2015-12-29
• 公開（公告）號: CN105497888B
• 公開（公告）日: 2018-07-27
• 發明（設計）人: 何平有;韓佳麗;鄒立宏;馬明;柳珊;郁宏偉;劉濤;梁武;朱秀同;楊保收
• 申請（專利權）人: 瑞普（保定）生物藥業有限公司
• 主分類號: A61K39/245
• 分類號: A61K39/245;A61K47/34;A61K47/42;A61K47/32;A61P35/00
• 代理公司: 石家莊冀科專利商標事務所有限公司 13108
• 代理人: 馬世敏

1.一種雞馬立克氏病耐熱保護劑活疫苗，其特征在于，由雞馬立克氏病病毒與耐熱保護劑混合凍干而成；所述耐熱保護劑由以下質量體積百分含量計的組分構成：蔗糖8～10％，聚乙烯吡咯烷酮2～4％，聚賴氨酸3～6％，酶解明膠1～2％，乳蛋白水解物2～6％，谷氨酰胺0.4～1％，L－精氨酸0.05～0.5％，甘油1～4％，蘆布若爾2～5％，余量為水。

2.一種權利要求1所述的雞馬立克氏病耐熱保護劑活疫苗的制備方法，其特征在于，制備按如下步驟進行：

a.細胞制備：用EDTA-胰酶消化SPF雞胚成纖維細胞，并加入細胞生長液，在36～37℃溫度下培養20～28小時，至生成細胞單層；所述EDTA-胰酶的濃度為質量體積百分含量為1％～3％；

b.接毒：種入雞馬立克氏病病毒，加入細胞培養液體積10％的輔助培養液，按100～200萬個/毫升復種雞胚成纖維細胞，36～37℃繼續培養2～4日；

c.收獲與凍干：細胞病變達75％～85％時，棄去90％細胞培養液，轉動細胞培養瓶，使細胞全部脫離瓶壁，收集、低速離心，取沉淀細胞并稱重，加入耐熱保護劑，進行勻漿和超聲波裂解，定量分裝和冷凍真空干燥，制成雞馬立克氏病耐熱保護劑活疫苗；

步驟b中輔助培養液為含有水解乳蛋白、精氨酸和谷氨酰胺的水溶液。

3.根據權利要求2所述的雞馬立克氏病耐熱保護劑活疫苗的制備方法，其特征在于，步驟a中EDTA-胰酶的消化溫度為2～8℃，消化時間為10～18小時。

4.根據權利要求2所述的雞馬立克氏病耐熱保護劑活疫苗的制備方法，其特征在于，步驟c中耐熱保護劑的加入量為每克沉淀細胞加入100～300ml。