[發明專利]一種腸膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制備方法

有效

• 申請號: 201510971582.2
• 申請日: 2015-12-21
• 公開（公告）號: CN105483177B
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 吳正鈞;韓瑨;徐曉芬;高彩霞;吳江
• 申請（專利權）人: 光明乳業股份有限公司
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12R1/01
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 朱水平;沈利

本發明公開了一種腸膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制備方法。所述制備方法包括以下步驟：1)將腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749接種于番茄汁蔗糖培養基中，發酵培養獲得發酵液；2)將步驟1)所得發酵液冷凍干燥后，取粉末用堿液浸提，取上清，調節上清pH值至7，取沉淀，冷凍干燥即得。該制備方法所用番茄汁蔗糖培養基主要原料為番茄，其來源廣、成本低、天然安全，在降低物料成本的同時，提高了食品安全性，發酵菌種為腸膜明串珠菌單一菌種，上述組合有利于產品品質的標準化與工業大規模生產的成本控制，其應用前景十分廣闊。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種腸膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制備方法。

背景技術

水不溶性葡聚糖(Insoluble glucan，IG)是一類不溶于水、以葡萄糖為單一組分聚合而成的一種糖類多聚物，這類理化性質特殊的碳水化合物不但來源廣泛，在植物、真菌以及細菌的代謝產物中均有報道，而且種類繁多。目前報道較多的IG有dextran、curdlan和cellulose三種，從結構特點來看，已報道的這些IG的分支僅由α-(1,2)、α-(1,3)或α-(1,4)糖苷鍵中的一種將支鏈與主鏈連接起來，極少涉及2種或以上糖苷鍵的分支結構。因此，新構型IG的篩選與發現不僅為IG家族增添了新的成員，而且極大地推動了IG結構有關研究的前沿領域。

此外，目前IG的獲得都來自合成培養基，此類培養基成分多樣，配方復雜，配制過程繁瑣具有潛在食品安全風險，再者，制備的成本相對較高、IG的來源相對有限，上述問題很大程度上限制了IG的開發和利用。

發明內容

本發明為了解決目前水不溶性葡聚糖的制備使用的是成分多樣，配方復雜的合成培養基存在的成本較高，培養基配制繁瑣，存在食品安全風險等問題，提供了一種腸膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制備方法。該制備方法所用番茄汁蔗糖培養基安全純天然，配制簡單，原料來源廣泛，成本低。

本發明人發現保藏號為CGMCC No.100064的腸膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)BD3749在番茄汁蔗糖培養基中振蕩培養后的發酵液經冷凍干燥，堿液浸提，離心得到的上清液，再經酸液調節pH至7，離心取沉淀，冷凍干燥可獲得具有特殊結構的水不溶性胞外多糖，從而完成了本發明。

為解決上述技術問題，本發明采取的技術方案是：一種腸膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

1)將腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749接種于番茄汁蔗糖培養基中，發酵培養獲得發酵液；

2)將步驟1)所得發酵液冷凍干燥后，取粉末用堿液浸提，取上清，調節上清pH值至7，取沉淀，冷凍干燥即得。

本發明制備方法步驟1)為：將腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749接種于番茄汁蔗糖培養基中，發酵培養獲得發酵液。

本發明步驟1)腸膜明串珠菌BD3749已于2014年11月26日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，郵編：100101。該菌株的建議的分類命名為：腸膜明串珠菌Leuconostoc mesenteroides，該菌株的保藏編號為：CGMCC No.10064，所保藏的培養物名稱為：BD3749。