[發明專利]一種腸膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制備方法

有效

• 申請號: 201510971582.2
• 申請日: 2015-12-21
• 公開（公告）號: CN105483177B
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 吳正鈞;韓瑨;徐曉芬;高彩霞;吳江
• 申請（專利權）人: 光明乳業股份有限公司
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12R1/01
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 朱水平;沈利

1.一種腸膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

1)將保藏號為CGMCC No.100064的腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749接種于番茄汁蔗糖培養基中，發酵培養獲得發酵液；所述的番茄汁蔗糖培養基由包括以下步驟的方法制備：番茄榨汁，將所得榨汁過濾后煮沸，離心取上清液，加入蔗糖加熱溶解后冷卻，調節pH值，滅菌后冷卻即得；

其中，所述蔗糖的加入量為5～30％；

所述pH值為5～8；

所述的發酵培養的發酵溫度為15～37℃；

2)將步驟1)所得發酵液冷凍干燥后，取粉末用堿液浸提，取上清，調節上清pH值至7，取沉淀，冷凍干燥即得；

所述的水不溶性胞外多糖為一種主鏈由α-(1,6)糖苷鍵連接而成，支鏈由α-(1,3)和α-(1,4)糖苷鍵連接而成的葡聚糖，其中，糖苷鍵α-(1,6)∶α-(1,3)∶α-(1,4)的摩爾比例為1∶0.2～0.3∶0.3～0.4。

2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的腸膜明串珠菌的制備方法還包括腸膜明串珠菌BD3749活化獲得腸膜明串珠菌種子的步驟。

3.如權利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟1)所述過濾的方法為利用80～120目紗布過濾取汁；所述煮沸的時間為1～10分鐘；所述離心的速度為4,000～12,000g，離心的時間為8～12分鐘；所述滅菌的溫度為110～135℃，所述滅菌的時間為10～30分鐘；所述pH值的調節方法為加入食品級堿調節pH值，所述食品級堿是：Na₂CO₃、NaHCO₃和NaOH中的一種或多種。

4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述蔗糖的加入量為10～20％；所述pH值為6～7；所述的發酵培養的發酵溫度為25℃～33℃。

5.如權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述蔗糖的加入量為10％；所述pH值為7；所述的發酵培養的發酵溫度為30℃。

6.如權利要求5所述制備方法，其特征在于，步驟1)所述煮沸時間為3～8分鐘；所述離心的速度為6,000～10,000g，所述離心的時間為9～11分鐘；所述滅菌的溫度為115～125℃，所述滅菌的時間為15～25分鐘。

7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述煮沸時間為5分鐘；所述離心的速度為8,000g，所述離心的時間為10分鐘；所述滅菌的溫度為121℃，所述滅菌的時間為20分鐘。

8.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的腸膜明串珠菌的接種量為1～5％，所述百分比為體積百分比。

9.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的腸膜明串珠菌的接種量為2～4％。

10.如權利要求9所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述的腸膜明串珠菌的接種量為3％。

11.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述發酵培養為振蕩培養，振蕩的速度為100～300rpm。

12.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述發酵時間為24～96小時。

13.如權利要求11所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述振蕩的速度為150～250rpm。

14.如權利要求12所述的制備方法，其特征在于，步驟1)所述發酵時間為48～84小時。