[發明專利]肉芝軟珊瑚提取物的生物活性MTT測定方法在審
| 申請號: | 201510959582.0 | 申請日: | 2015-12-21 |
| 公開(公告)號: | CN106896073A | 公開(公告)日: | 2017-06-27 |
| 發明(設計)人: | 褚方強 | 申請(專利權)人: | 青島清泉生物科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N21/31 | 分類號: | G01N21/31 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266613 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 肉芝軟 珊瑚 提取物 生物 活性 mtt 測定 方法 | ||
1.一種肉芝軟珊瑚提取物的生物活性MTT測定方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)取對數期腫瘤細胞,調整細胞懸液的濃度為200000個/mL,每孔200μL,加入96孔細胞培養板中;
(2)在培養箱中培養4h(37oC,5%CO2);
(3)待測樣品分別設5個濃度梯度(每個濃度3個平行樣),同時設陰性、陽性對照,每孔加空白液或樣品液2μL,培養72h;
(4)每孔加入MTT液10μL,繼續培養4h;
(5)終止培養,離心8min(37oC、2000r/min),吸去孔內培養液;
(6)每孔加入DMSO各100μL,于微量振蕩器中振蕩15min,直至結晶充分溶解;
(7)酶標儀測定每孔在570nm處的吸光值(即OD值),取三孔的平均OD值,按公式IR%=(OD空白對照-OD樣品)/OD空白對照×100%計算樣品對細胞增殖的抑制率(IR%)。
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