[發(fā)明專利]一種鑒定中國明對蝦遺傳性別的DNA序列標(biāo)簽及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510944785.2
• 申請日: 2015-12-16
• 公開（公告）號(hào): CN105349691B
• 公開（公告）日: 2018-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李詩豪;李富花;相建海
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院海洋研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/6888
• 分類號(hào): C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

本發(fā)明涉及一種中國明對蝦性別差異的DNA序列標(biāo)簽及其應(yīng)用。通過高通量測序手段，分別對雌性個(gè)體和雄性個(gè)體DNA的混池進(jìn)行高通量測序，測序結(jié)果經(jīng)過生物信息學(xué)分析篩選出在雌雄混池中有顯著差異的DNA序列片段，獲得的差異片段在不同來源的雌雄個(gè)體中進(jìn)行驗(yàn)證，最終獲得一條可以用于鑒定中國明對蝦雌雄性別的DNA序列標(biāo)簽，利用該DNA序列標(biāo)簽可以實(shí)現(xiàn)該種對蝦遺傳性別的準(zhǔn)確鑒定。本發(fā)明方法具有高效、準(zhǔn)確、可靠的特點(diǎn)，在對蝦性別鑒定、性別決定和分化機(jī)制及性別控制研究中具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及水產(chǎn)生物技術(shù)中的對蝦性別鑒定和性別控制技術(shù)，具體地說，一種鑒定中國明對蝦遺傳性別的DNA序列標(biāo)簽及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

中國明對蝦是我國重要的養(yǎng)殖蝦類，由于其個(gè)體較大，營養(yǎng)價(jià)值高，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。中國明對蝦與其他對蝦種類一樣，雌雄個(gè)體的大小存在明顯差異，雌性個(gè)體在生長的中后期生長速度遠(yuǎn)高于雄性個(gè)體，因此實(shí)現(xiàn)中國明對蝦的單性控制，培育單性群體，對于提高對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量、增加經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。

要培育中國明對蝦的單性群體，首先需要實(shí)現(xiàn)對蝦遺傳性別的鑒定。雖然在對蝦生長到一定階段時(shí)可以通過表型的外部性征實(shí)現(xiàn)雌雄蝦的性別鑒定，但是在科學(xué)研究和實(shí)際生產(chǎn)中，如果能夠在發(fā)育早期實(shí)現(xiàn)性別的鑒定，可以有針對性地對某一性別的個(gè)體開展實(shí)驗(yàn)和養(yǎng)殖，加快科學(xué)研究和實(shí)際生產(chǎn)的效率。

在對蝦性別標(biāo)記的研究中，已經(jīng)有較多進(jìn)行性別標(biāo)記篩選的報(bào)道，Staelens etal.(2008)構(gòu)建了斑節(jié)對蝦的高密度遺傳連鎖圖譜，并從遺傳圖譜上發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)性別差異的標(biāo)記，該標(biāo)記在其他遺傳來源的斑節(jié)對蝦群體中也證實(shí)了其可以作為一種進(jìn)行性別鑒定的標(biāo)記，并且該團(tuán)隊(duì)也申請了相關(guān)專利一項(xiàng)(蝦和對蝦的性別特異性標(biāo)記，中國發(fā)明專利，申請?zhí)枺?00780015173.9)；Zhang et al.(2006)通過QTL定位方法篩選到了一個(gè)凡納濱對蝦性別特異性的微衛(wèi)星位點(diǎn)，后來證實(shí)該微衛(wèi)星位點(diǎn)是家系特異性的，在其他來源的個(gè)體中并不適用；同樣，Alcivar-Warren et al.(2007)的研究也發(fā)現(xiàn)了凡納濱對蝦性別特異性的微衛(wèi)星標(biāo)記，但是也是僅限于所研究的群體。然而，由于對蝦不同物種的差異性，其它物種的分子標(biāo)記并不能用于中國明對蝦的性別鑒定。在中國明對蝦的研究中，雖然構(gòu)建了較多的連鎖圖譜，但是未篩選到相應(yīng)的性別鑒定標(biāo)記(Li et al.2006；Sun et al.2008；Liuet al.2010)。Li et al.(2013)通過基因差異表達(dá)分析的方法篩選到了一個(gè)中國明對蝦雌雄差異表達(dá)的基因，并將該標(biāo)記開發(fā)成了一種可以用作雌雄幼體性別鑒定的標(biāo)記(中國發(fā)明專利，公開號(hào)：101709332A)，然而此標(biāo)記是在轉(zhuǎn)錄組水平上發(fā)展的標(biāo)記，受蝦的生長發(fā)育時(shí)期的影響較大，不能用于對蝦在幼蝦階段之前的性別區(qū)分。目前用于中國明對蝦性別鑒定的DNA標(biāo)記還沒有報(bào)道。

參考文獻(xiàn)

1.Alcivar-Warren,A.,D.Meehan-Meola,S.W.Park,Z.Xu,M.Delaney andG.Zuniga(2007).ShrimpMap:A low-density,microsatellite-based linkage map ofthe pacific whiteleg shrimp,Litopenaeus vannamei:Identification of sex-linkedmarkers in linkage group 4.Journal of Shellfish Research 26(4):1259-1277.

2.Li,S.,F.Li,Y.Xie,B.Wang,R.Wen,C.Zhang,K.Yu and J.Xiang(2013).Screening of Genes Specifically Expressed in Males of Fenneropenaeuschinensis and Their Potential as Sex Markers.Journal of Marine Biology:1-9.