[發明專利]一種發酵丙酸及其鹽的方法

在審

• 申請號: 201510924373.2
• 申請日: 2015-12-14
• 公開（公告）號: CN106868062A
• 公開（公告）日: 2017-06-20
• 發明（設計）人: 李兆仁;羅伯特·華彼克
• 申請（專利權）人: 沈陽華美畜禽有限公司
• 主分類號: C12P7/52
• 分類號: C12P7/52;C12R1/01
• 代理公司: 沈陽優普達知識產權代理事務所(特殊普通合伙)21234
• 代理人: 俞魯江

技術領域

本發明涉及微生物發酵技術領域，具體涉及一種發酵丙酸及其鹽的方法。

背景技術

丙酸及其鈣鹽作為一種防腐保鮮劑，對于霉菌、酵母菌及細菌等具有廣泛的抗菌作用，尤其是丙酸鈣，在酸性條件下，產生游離丙酸，具有抗菌作用。在酸性介質(淀粉、含蛋白質和油脂物質)中丙酸及其鈣鹽對各類霉菌、革蘭氏陰性桿菌或好氧芽孢桿菌有較強的抑制作用，還可以抑制黃曲霉素的產生，而對酵母菌無害，對人畜無害，無毒副作用，并能給人畜提供必需的鈣。因此丙酸及其鈣鹽是食品、釀造、飼料、中藥制劑諸方面的一種新型、安全、高效的食品與飼料用防霉劑，被廣泛的應用于食品、飼料、醫藥等方面。

發明內容

本發明目的是提供一種發酵丙酸及其鹽的方法。

為實現本發明的目的采用如下技術方案：

一種發酵丙酸及其鹽的方法，將產酸丙酸桿菌活化，接種于含有丙酸的種子培養基，在無氧條件下，25℃，培養36h；

將所得菌液接種于發酵培養基中，在無氧條件下，恒溫25℃，運算160rpm，發酵至PH穩定，期間通過堿或鹽溶液將PH值保持在7。

所述種子培養基中：丙酸按重量體積百分比為1％-1.5％g/ml。

產酸丙酸桿菌的接種量為3v/v％～4v/v％。

所述種子培養基按重量體積百分比計算，酵母浸膏1.2-1.5％、牛肉湯1-2％、磷酸氫二鉀1-2％、磷酸二氫鉀1.5-2.5％、甘油5-10％，余量為水，pH 7.0。

所述發酵培養基按重量體積百分比為酵母浸膏2.5-3％、蛋白胨1-2％、磷酸氫二鉀0.5-1.5％、磷酸二氫鉀0.25-1％、甘油4-10％，余量為水，pH7.0。

所述產酸丙酸桿菌接種于種子培養基的接種量為3-8v/v％。

本發明的優點是：本發明所述發酵生產丙酸的方法在種子培養基中加入丙酸對產酸丙酸桿菌進行誘導培養，進一步在發酵過程中對發酵pH進行分段控制，可以提高丙酸的含量，縮短丙酸發酵時間，明顯提高丙酸的生產效率。

具體實施方式

一種發酵丙酸及其鹽的方法，將產酸丙酸桿菌活化，接種于含有丙酸的種子培養基，在無氧條件下，25℃，培養36h；

將所得菌液接種于發酵培養基中，在無氧條件下，恒溫25℃，運算160rpm，發酵至PH穩定，期間通過堿或鹽溶液將PH值保持在7。

所述種子培養基中：丙酸按重量體積百分比為1％-1.5％g/ml。

產酸丙酸桿菌的接種量為3v/v％～4v/v％。

所述種子培養基按重量體積百分比計算，酵母浸膏1.2-1.5％、牛肉湯1-2％、磷酸氫二鉀1-2％、磷酸二氫鉀1.5-2.5％、甘油5-10％，余量為水，pH 7.0。

所述發酵培養基按重量體積百分比為酵母浸膏2.5-3％、蛋白胨1-2％、磷酸氫二鉀0.5-1.5％、磷酸二氫鉀0.25-1％、甘油4-10％，余量為水，pH7.0。所述產酸丙酸桿菌接種于種子培養基的接種量為3-8v/v％。

實施例1

一、預處理

將常規甘油保藏的產酸丙酸桿菌按照1％的接種量接種于裝有種子培養基的厭氧瓶(100ml厭氧瓶裝100ml種子培養基)中，向厭氧瓶中充氮氣后，置于25℃培養箱靜置培養36h。按重量體積百分比(g/ml)計，種子培養基的成分為，酵母浸膏：1.5％、牛肉湯：1.5％、磷酸氫二鉀：2.5％、磷酸二氫鉀：1.5％、甘油：8％，余量為水，pH 7.0。

二、種子液

將上述厭氧瓶培養所得菌種按照1％的接種量無菌轉入裝有種子培養基的厭氧瓶(250ml厭氧瓶裝200ml種子培養基)，充入無菌氮氣，培養溫度為25℃，時間為36h。按重量體積百分比(g/ml)計，種子培養基的成分為，酵母浸膏：3％、蛋白胨：1.5％、磷酸氫二鉀：1.2％、磷酸二氫鉀：0.5％、甘油：8％，余量為水，pH 7.0。

三、生產發酵

1、在10L發酵罐中投入6L發酵培養基，發酵培養基成分：按重量體積百分比計，酵母浸膏：3％、蛋白胨：1.5％、磷酸氫二鉀：1.2％、磷酸二氫鉀：0.5％、甘油：8％，余量為水，pH 7.0。

2、將種子液按照10％的接種量接種于發酵罐中；

發酵生產：培養溫度為25℃，攪拌速率80rpm，并保持氮氣的持續充入。通過流加重量體積比(g/ml)為10％的Ca(OH)₂溶液，將pH值維持在7.0。

3、發酵過程結束：