[發明專利]一種提高黃芪薄層色譜鑒定的方法

有效

• 申請號: 201510923327.0
• 申請日: 2015-12-11
• 公開（公告）號: CN105403654B
• 公開（公告）日: 2017-04-05
• 發明（設計）人: 馬中森;安瑩娟;趙洋洋;董立定;李慧林;潘麗娟;常文軍;李斌;梁愛軍;李宏強
• 申請（專利權）人: 隴西保和堂藥業有限責任公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種提高黃芪薄層色譜鑒定的方法。

背景技術

本品為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，春、秋二季采挖，除去須根和根頭，沖洗干凈，潤透，趁鮮切厚片，干燥，稱為“黃芪片”，本品表面淡棕黃色或淡棕褐色，有不整齊的縱溝紋或縱溝。質硬而韌，斷面纖維性強，并顯粉性，皮部黃白色，木部淡黃色，有放射狀紋理和裂隙。氣微，味微甜，嚼之微有豆腥味。

中藥質量標準的工作現已全面展開，中醫藥學者結合當前質量標準研究中有關問題，提出了一些看法。首先是標題的擬定，最好能體現出檢驗方法的建立和標準規格的制定兩項內容，其次重要的是鑒別實驗，主要解決被檢藥物的真偽問題，有性狀鑒別、顯微鑒別和理化鑒別等。理化鑒別中除一般的化學實驗如顏色反應外，當前大量應用的是層析法，而又以薄層層析應用最廣泛，因其簡便、易行、靈敏度高、專屬性強，具有分離與鑒定雙重功能，特別適用于成分復雜的中藥及其制劑的鑒別，只要一些特征斑點具再現性，就可作為確認依據，在薄層實驗中可以選用化學單體、提取物、藥材對照品等來做對照鑒別。

中國藥典2010，(附錄ⅥB)，提供了照薄層色譜法試驗，通過對樣品加熱回流，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱，收集洗脫液，蒸干，殘渣溶解，提取、洗滌等步驟完成，作為供試品溶液，進行點樣，但是其需要過中性氧化鋁柱，成本高，其色譜清晰度不高。

發明內容

本發明為了克服現有技術中上述不足問題，提供一種提高黃芪薄層色譜鑒定的方法，在回流過濾后的殘渣中加入了皂化液皂化，方法簡單，除雜質效果明顯且提高了黃芪甲苷在色譜中的清晰度。

為了實現上述目的，本發明一種提高黃芪薄層色譜鑒定的方法包括以下步驟：

(1)首先將黃芪研磨為粉末，用稱量天平精確稱取該粉末2-3g，加入三氯甲烷-正丁醇75ml，加熱回流，3h后，過濾，然后將濾液蒸干，殘渣再加入8mL-10mL的KOH-甲醇皂化液，置于60℃-65℃恒溫水浴30min-40min；濾過，再次加入8mL-10mL的KOH-甲醇皂化液，置100℃水浴加熱回流0.5-1h，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，移至分液漏斗中；再加入2mL甲醇使黃芪殘渣充分溶解后，超聲提取30min-40min后，再加入乙酸乙酯萃取兩次，每次30mL，蒸干萃取液，加入甲醇使之溶解，這個作為供試樣；

(2)吸取5μl上述溶液分別點于同一硅膠G薄層板上，同一展開劑，先展開，再取出，再晾干，置JL-P10A觀片燈下或日光紫外光燈365nm下檢視，最后拍照，在薄板上可以很穩定的顯示出清晰條帶，且樣品中條帶呈現出規律的一致性，在3小時內橙黃色顯色較為穩定，即可判斷為黃芪。

所述的步驟(1)中三氯甲烷與正丁醇體積比為2：1。

所述的步驟(1)中超聲提取功率為40-90W，超聲溫度是4℃-10℃，提取1-4次。

所述的步驟(1)中所述的中KOH-甲醇皂化液質量濃度：20％。

所述的步驟(2)中所述的展開劑為：三氯甲烷與正己烷，其中三氯甲烷：正己烷＝3：1。

所述的步驟(2)中所述的展開劑為：石油醚與乙酸乙酯，其中石油醚：乙酸乙酯＝7：1。

本發明的有益效果：與現有技術相比，本發明在初次回流過濾后的殘渣中加入了造化液皂化，方法簡單，除雜質效果明顯，解決了黃芪甲苷在色譜中的清晰度不高的問題，是一種準確、清晰而又快速的鑒別黃芪的方法。

附圖說明

圖1為日光燈黃芪片薄層色譜鑒別圖，S-黃芪甲苷對照品，1-10號為黃芪樣品。

圖2為紫外光燈黃芪片薄層色譜鑒別圖，S-黃芪甲苷對照品，1-10號為黃芪樣品。

具體實施方式

以下通過具體實施例對本發明作進一步說明，但是本發明所保護的權利范圍不僅限于以下實施例。

本發明的實驗方法及參數：

1.主要材料：

2.主要試劑：

三氯甲烷，正丁醇，KOH，甲醇，乙酸乙酯，正己烷，石油醚，乙酸乙酯。硅膠G薄層板、聚酰胺薄板，蒸餾水，90％乙醇溶液等。

實施例1