[發明專利]一種高純度熊果酸的制備方法

有效

• 申請號: 201510918458.X
• 申請日: 2015-12-10
• 公開（公告）號: CN105503994B
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發明（設計）人: 欒連軍;劉雪松;談滿良;楊英士
• 申請（專利權）人: 蘇州澤達興邦醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙)11369
• 代理人: 史霞

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種高純度熊果酸的制備方法。

背景技術

熊果酸(ursolic acid,UA)是一種弱極性的五環三萜類化合物，分子式為C30H48O3，分子量為456.68，結構復雜。由于其具有多樣的藥理功能，因而受到國內外廣泛關注，市場需求量很大；熊果酸在植物界分布廣泛，但其含量較低，目前國內外尚未實現人工合成，因而深入研究熊果酸的提取純化工藝，對開發熊果酸的系列產品具有重要意義。

發明內容

針對上述技術中存在的不足之處，本發明提供了一種工藝簡單安全的高純度熊果酸的制備方法。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：一種高純度熊果酸的制備方法，包括如下步驟：步驟一、將低含量熊果酸提取物加水攪拌，經過濾除去水溶性雜質，得到粗提取物；步驟二、向粗提取物中加入乙醇除雜，經過濾干燥得到除雜提取物；步驟三、向除雜提取物中加入乙酸乙酯與石油醚的混合溶劑攪拌脫脂，再加入果膠—淀粉復合酶液攪拌離心去除油脂層，并經過濾干燥得到脫脂提取物；步驟四、向脫脂提取物中加入堿性熱乙醇溶解后進行脫色處理，經過濾得到脫色提取液；步驟五、調節脫色提取液的pH至7～8，靜置析晶得到析晶熊果酸；步驟六、向析晶熊果酸中加入堿性熱乙醇溶解，并調節pH至7，靜置析晶即得高純度熊果酸。

優選的，所述步驟一中的低含量熊果酸提取物為熊果酸含量在20～25％之間的熊果酸提取物。

優選的，所述步驟一中的加水量為低含量熊果酸提取物用量的10～15倍，除雜溫度為20～30℃，除雜時間1～2h。

優選的，所述步驟二中的乙醇濃度為60～70％，其用量為粗提取物的10～15倍，除雜溫度為20～30℃，除雜時間為1～2h。

優選的，所述步驟三中果膠—淀粉復合酶液的加酶量為混合溶劑用量的1000～3000u/g。

優選的，所述步驟四中堿性熱乙醇的濃度為80～85％，pH為12～13，其用量為脫脂提取物的10～15倍。

優選的，所述步驟四中脫色處理過程為：脫脂提取物中加入堿性熱乙醇溶解后，加入廢白土進行預脫色，得到預脫色提取物，再向預脫色提取物中加入凹凸棒土和硅藻土進行復脫色處理，經過濾得到脫色提取液。

優選的，預脫色工藝參數如下：廢白土的加入量為1.0～2.0％，預脫色時間為1.5～2h，預脫色溫度為75～80℃。

優選的，復脫色工藝參數如下：凹凸棒土的加入量為2.0～3.0％，硅藻土的加入量為0.1～0.2％，復脫色時間為2～3h，復脫色溫度為80～90℃。

優選的，所述步驟五中向脫色提取液中加入濃度為2～2.5mol/L的鹽酸調節pH至7～8，靜置析晶溫度為20～30℃，析晶時間為12～18h。

本發明與現有技術相比，其有益效果是：本發明提供的高純度熊果酸的制備方法，通過將脫脂提取物先后經預脫色和復脫色處理，并在析晶前調節提取液至適宜的pH，克服了轉移率低的缺陷，提高了純化效率；熊果酸總轉移率可達到85％以上，純度高達98％以上；該制備方法工藝簡單安全、成本低，利于大規模生產。

具體實施方式

本發明提供了一種高純度熊果酸的制備方法，包括如下步驟：

步驟一、將熊果酸含量在20～25％之間的低含量熊果酸提取物加水攪拌，經過濾除去水溶性雜質，加水量為低含量熊果酸提取物用量的10～15倍，除雜溫度為20～30℃，除雜時間1～2h，得到粗提取物；

步驟二、向粗提取物中加入乙醇除雜，乙醇濃度為60～70％，其用量為粗提取物的10～15倍，除雜溫度為20～30℃，除雜時間為1～2h，經過濾干燥得到除雜提取物；

步驟三、向除雜提取物中加入乙酸乙酯與石油醚的混合溶劑(1：1，V/V)攪拌脫脂，再加入果膠—淀粉復合酶液攪拌離心去除油脂層，所述果膠—淀粉復合酶液的加酶量為混合溶劑用量的1000～3000u/g，并經過濾干燥得到脫脂提取物；

步驟四、向脫脂提取物中加入堿性熱乙醇溶解后，加入廢白土進行預脫色，得到預脫色提取物，再向預脫色提取物中加入凹凸棒土和硅藻土進行復脫色處理，經過濾得到脫色提取液；