[發明專利]一種姜黃組織培養快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201510918231.5
• 申請日: 2015-12-11
• 公開（公告）號: CN105557513A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 王曉峰;李剛;韋坤華;梁瑩;肖冬;王一諾;李林軒;李翠;繆劍華
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區藥用植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 黃永校

技術領域

本發明涉及一種植物繁殖方法，特別是一種姜黃組織培養快速繁殖方法。

背景技術

藥材姜黃又名寶鼎香、黃姜，為姜科植物，姜黃(CurcumalongaL.)的干燥根莖，具有 破血、行氣、通經、止痛的功效，用于治療風濕、肩臂酸痛、胸脅疼痛、痛經以及損傷瘀痛 等。

現代研究表明，姜黃根莖以姜黃素類為主，含有倍半萜類化合物、酸性多糖、揮發油類、 菜油甾醇厚等多種復雜成分，具有保護免疫系統(抗炎、創傷愈合等)、消化系統(抗潰瘍、 解痙)、心血管系統(降壓、降血脂、抗血凝)和保肝利膽作用，以及興奮子宮、抗生育、抗 氧化、抗突變、抗腫瘤、抗艾滋病、抗老年癡呆、抗病原微生物及原蟲等廣泛藥理活性，且 無毒副作用。

我國己經開發出多種以姜黃為主要原料的中成藥，如：馬應龍麝香痔瘡膏、舒肝片、珊 瑚癬凈等。美國國立腫瘤研究所將姜黃素列為第三代癌化學預防藥。除了用于臨床中藥配方、 作為多種傳統中成藥和抗菌消炎、抗腫瘤類新藥開發的重要原料外，姜黃色素還被廣泛用作 食品添加劑、飲料原料、染料添加劑，以及香水等日化用品，出口東南亞和歐美等國家，表 現廣闊的開發潛力和市場前景。因此，隨著規模開發利用的需求，姜黃的種植面積不斷擴大。

植物姜黃主要分布于四川、福建、江西、在廣西、湖北、陜西、臺灣、云南等地也有栽 培。但是，姜黃開花很少，大多數種子不充實，栽培上主要利用根莖繁殖，稱為“種姜”，即 “老母姜”，但不能使用老母姜作種，要待子姜繁殖出的長成后的母姜，即“二母姜”才行， 因此，姜黃和繁殖速度慢、效率低下。迄今尚無姜黃組織培養研究的報道。

發明內容

本發明通過以下技術方案達到上述目的，一種姜黃組織培養快速繁殖方法，包括如下步 驟：

(1)外植體的選擇與消毒：取姜黃地下塊莖作外為植體，先用2v/v％的洗潔精水溶液 浸泡20min，線狀自來水沖洗15-20min，再用添加了2-3滴吐溫-20的0.1m/v％的升汞消 毒10-15min，無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙吸去除外植體表面水份，其中，無菌水為 經高溫高壓滅菌的蒸餾水；

(2)塊莖發芽培養和獲得無菌試管苗：將步驟(1)中獲得的外植體接種到MS發芽培 養基中培養得到無菌試管苗，其中MS發芽培養基中添加IAA0.1-0.5mg/L、6-BA0.5-2.0 mg/L、蔗糖30mg/L、瓊脂5mg/L，pH值5.8；

(3)試管苗快速繁殖和獲得叢生芽：將步驟(2)中得到的試管苗接種至MS叢芽培養 基中培養25-30d，獲得叢生芽，其中，MS叢芽培養基中添加ZT0.1-1.0mg/L、IBA0.1-1.0 mg/L、蔗糖30mg/L、瓊脂5mg/L，pH值5.8；

(4)叢生芽壯苗培養：將步驟(3)中得到的叢生芽轉接至MS壯苗培養基中培養25-35 d，得到健壯植株，其中MS壯苗培養基中添加6-BA0.5-1.5mg/L、NAA0.1-0.5mg/L、蔗糖 30mg/L、瓊脂5mg/L，pH值5.8；

(5)生根培養：將步驟(4)中得到的健壯植株轉接至1/2MS生根培養基中培養25-35d， 得到帶根完整植株，其中1/2MS培養基中添加NAA0.1-1.0mg/L、IBA0.1-0.5mg/L、蔗糖15 mg/L、瓊脂5mg/L，pH值5.8；

(6)煉苗與移栽：室溫下打開組培瓶蓋，加入少量自來水，煉苗7天；待培養基表面形 成角質后，取出幼苗，洗凈根部培養基，移栽到沙床中；在沙床中生長27-33d，移栽到大田。

本發明突出的優點在于：

(1)通過姜黃組織培養，在短時間內培育出大量適合移栽的姜黃種苗，顯著提高姜黃種 苗的增殖系數和種苗質量，實現規模化生產，滿足市場需求。

在MS發芽誘導培養基中添加6-BA0.5-2.0mg/L，可顯著促使芽萌動，添加IAA0.1-0.5 mg/L，可促使芽伸展，從而產生大量叢生芽；在MS壯苗培養基添加NAA0.1-0.5mg/L可促 進叢生芽長高和展葉。

(2)采用本發明培養所得到的組培苗增殖系數達到10-15倍，獲得組培苗生根率在98％ 以上，移栽苗床成活率在95％以上，有效解決了姜黃工廠化育苗的問題。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明的技術方案進一步說明,