[發明專利]一種姜黃組織培養快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201510918231.5
• 申請日: 2015-12-11
• 公開（公告）號: CN105557513A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 王曉峰;李剛;韋坤華;梁瑩;肖冬;王一諾;李林軒;李翠;繆劍華
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區藥用植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 黃永校

1.一種姜黃組織培養快速繁殖方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)外植體的選擇與消毒：取姜黃地下塊莖作外為植體，先用2v/v％的洗潔精水溶液 浸泡20min，線狀自來水沖洗15-20min，再用添加了2-3滴吐溫-20的0.1m/v％的升汞消毒 10-15min，無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙吸去除外植體表面水分，其中，無菌水為經 高溫高壓滅菌的蒸餾水；

(2)塊莖發芽培養和獲得無菌試管苗：將步驟(1)中獲得的外植體接種到MS發芽培 養基中培養得到無菌試管苗，其中MS發芽培養基中添加IAA0.1-0.5mg/L、6-BA0.5-2.0 mg/L、蔗糖30mg/L、瓊脂5mg/L，pH值5.8；

(3)試管苗快速繁殖和獲得叢生芽：將步驟(2)中得到的試管苗接種至MS叢芽培養 基中培養25-30d，獲得叢生芽，其中，MS叢芽培養基中添加ZT0.1-1.0mg/L、IBA0.1-1.0 mg/L、蔗糖30mg/L、瓊脂5mg/L，pH值5.8；

(4)叢生芽壯苗培養：將步驟(3)中得到的叢生芽轉接至MS壯苗培養基中培養25-35 d，得到健壯植株，其中MS壯苗培養基中添加6-BA0.5-1.5mg/L、NAA0.1-0.5mg/L、蔗糖 30mg/L、瓊脂5mg/L，pH值5.8；

(5)生根培養：將步驟(4)中得到的健壯植株轉接至1/2MS生根培養基中培養25-35d， 得到帶根完整植株，其中1/2MS培養基中添加NAA0.1-1.0mg/L、IBA0.1-0.5mg/L、蔗糖15 mg/L、瓊脂5mg/L，pH值5.8；

(6)煉苗與移栽：室溫下打開組培瓶蓋，加入少量自來水，煉苗7天；待培養基表面形 成角質后，取出幼苗，洗凈根部培養基，移栽到沙床中；在沙床中生長27-33d，移栽到大田。