[發(fā)明專利]一種產(chǎn)酸屎腸球菌、抑菌微生態(tài)制劑及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510917814.6
• 申請(qǐng)日: 2015-12-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105368755A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李富偉;吳培均;駱驊;李兆勇;韓明渠;楊忠廣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京科為博生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P21/00;A23K10/18;A23K20/195;C12R1/125;C12R1/01
• 代理公司: 北京方安思達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11472
• 代理人: 王宇楊;陳琳琳

1.一種產(chǎn)酸屎腸球菌CE001(Enterococcusfaecium)，其特征在于，所述屎腸球菌的菌種保藏編號(hào)為：CGMCCNO.9666。

2.一種抑菌微生態(tài)制劑，其特征在于，所述抑菌微生態(tài)制劑包括枯草芽孢桿菌所產(chǎn)細(xì)菌素和權(quán)利要求1所述的產(chǎn)酸屎腸球菌；所述細(xì)菌素與屎腸球菌的比例為1g細(xì)菌素比2～5億屎腸球菌活菌數(shù)。

3.一種權(quán)利要求2所述抑菌微生態(tài)制劑的制備方法，包括以下步驟：

1)將制備的枯草芽孢桿菌所產(chǎn)細(xì)菌素按比例加入到發(fā)酵后期的屎腸球菌發(fā)酵液中，攪拌混合均勻；

2)將混合后的發(fā)酵液固液分離獲得菌泥，在菌泥中加入干燥保護(hù)劑，所述菌泥與干燥保護(hù)劑的質(zhì)量體積比(g/L)為5％～25％，采用制粒、凍干或噴霧干燥制成抑菌微生態(tài)制劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述細(xì)菌素的制備包括以下步驟：

1)將枯草芽孢桿菌菌株接種到發(fā)酵用培養(yǎng)液中，在30～39℃條件下，培養(yǎng)40～50h，得到發(fā)酵液；

2)將發(fā)酵液經(jīng)5000～12000r/m離心5-30min中取上清液，在上清液中緩慢加入硫酸銨固體粉末進(jìn)行鹽析，邊加邊攪拌，直到飽和度達(dá)20％～80％，然后在4～5℃條件下靜置4～12h，再在4～5℃條件下、以5000～12000r/m轉(zhuǎn)速離心10～30min，棄去上清液得到細(xì)菌素。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，所述屎腸球菌發(fā)酵液的制備方法包括以下步驟：

1)在種子培養(yǎng)基中，35～45℃有氧或兼性條件下培養(yǎng)屎腸球菌18～24小時(shí)，成為一級(jí)種子；

2)將一級(jí)種子液接種在種子罐中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，在35～45℃有氧或兼性條件下培養(yǎng)18～24小時(shí)，成為二級(jí)種子；

3)將獲得的二級(jí)種子液接種在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，在30～45℃有氧或兼性條件下，采用定時(shí)或連續(xù)補(bǔ)料分批發(fā)酵方式培養(yǎng)18～36小時(shí)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟1)和2)使用MRS培養(yǎng)基為種子培養(yǎng)基。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟3)發(fā)酵采用改良的MRS培養(yǎng)基，所述改良的MRS培養(yǎng)基是在每升MRS培養(yǎng)基中加有大豆蛋白胨5～30g，葡萄糖1～10g，酵母粉1～10g，乙酸鈉1～10g，檸檬酸二胺0.1～8g，Tween800.1～5g，磷酸氫二鉀0.1～5g，硫酸鎂0.05～lg，硫酸錳0.001～0.2g，碳酸鈣1～30g，純凈水1升，調(diào)節(jié)pH值至5.5～7.5。

8.權(quán)利要求1所述產(chǎn)酸屎腸球菌在抑菌和飼料添加劑方面的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求2所述抑菌微生態(tài)制劑在抑菌和飼料添加劑方面的應(yīng)用。