[發明專利]水產品常見病毒檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201510916133.8
• 申請日: 2015-12-11
• 公開（公告）號: CN105349705B
• 公開（公告）日: 2019-02-15
• 發明（設計）人: 劉凡;云振宇;孫昭;張瑤;劉貞;彭麗萍;胡太貴;鄧遠洪;黃廣平
• 申請（專利權）人: 四川華漢三創生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 楊志廷

本發明涉及水產品檢測用品領域內的一種水產品常見病毒檢測試劑盒，主要由引物組合和膜芯片組成，引物組合為7重聚合酶鏈式反應引物組合，其中，反向引物的5’端接上Tag序列，引物組合中還含有一條5’端帶生物素標志的Tag引物，膜芯片為順序固定在支持膜表面的7組探針序列、1組陽性對照探針序列和1組陰性對照探針序列。本發明克服了現有水產品病毒檢測技術費時費力成本高的缺陷，提供的水產品常見病毒檢測試劑盒操作簡單，快速靈敏，檢測通量大，檢測結果可視化，成本低廉。

所屬技術領域

本發明涉及水產品檢測用品領域，具體為水產品常見病毒檢測試劑盒。

背景技術

水產品是營養豐富的食品，尤其是魚類的蛋白質高、脂肪低、膽固醇少，為人們所喜食。然而，近年來，各類病毒嚴重威脅著水產品的健康可持續發展，水產品質量也因此受到嚴重影響。更為重要的是，部分水產品病毒，如甲肝病毒、諾瓦克病毒及類諾瓦克病毒會引起水產品相關疾病。水產品質量安全問題不僅關系到水產業的健康發展，也與人民群眾健康息息相關，加強水產品質量安全管理體系研究具有重大而深遠的意義。

核酸檢測技術作為分子生物學檢測技術的核心，在水產品病毒檢測中發揮著巨大作用。目前市面上水產品病毒核酸檢測方法主要為常規定性聚合酶鏈式反應（PCR），實時熒光PCR及基因芯片技術等。常規定性PCR操作簡單，但過程繁瑣，需通過瓊脂糖凝膠電泳檢測結果，檢測靈敏度低，且檢測過程中使用高致癌染料，對環境及人體危害非常大。實時熒光PCR檢測靈敏度高，但其設備昂貴、對操作人員專業素質、引物及模板質量要求高，且不同品牌間產品重復性及重現性不佳。使用常規定性PCR及實時熒光PCR法每次只能篩檢一種病毒指標，無法滿足同時針對水產品中多種病毒進行篩檢的需求。而基因芯片法利用核酸雜交原理，將待測病毒特異性探針固定于固相/液相芯片上，可同時檢測多種病毒指標，但其配套設備昂貴，通常用于科研工作中。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有水產品病毒檢測技術費時費力成本高的缺陷，提供一種操作簡單，快速靈敏，檢測通量大，檢測結果可視化，成本低廉的水產品常見病毒檢測試劑盒。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

本發明的水產品常見病毒檢測試劑盒，主要由引物組合和膜芯片組成，其特征在于引物組合為7重聚合酶鏈式反應（PCR）引物組合，各對引物的堿基序列5’-3’如下：

外參基因: 正向引物: GATTTGGACCTGCGAGC

反向引物: GGTTGGCCAGGCGCGAAG；

甲肝病毒: 正向引物: ACAACTGTAAATGGAACCCC

反向引物: AGCAACATGGATGCCCAA；

星狀病毒: 正向引物: GAATTTCCTCTCCGCCTGAC

反向引物: CGGTTGTTCTCATCAGAGTCC；

諾瓦克病毒: 正向引物: ACCTAACCACCAGAACCCCTT

反向引物: CTCAGCATCCATTGTTCCAAAGCG；

輪狀病毒: 正向引物: CTTTTCCATCCGAAATTAACAC

反向引物: AATATAAGGCAACCACGGTA；

脊灰病毒: 正向引物: AGGAGAAAATTATCCCACAAGC

反向引物: AAACATACTGGTTCAATACGGTG；

柯薩奇病毒: 正向引物: AAAACGTGGCAGCTAATGGA

反向引物: GCCACTCACCATAAGCAACA；