[發(fā)明專利]一種應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201510907693.7 | 申請(qǐng)日: | 2015-12-09 |
| 公開(公告)號(hào): | CN105349529A | 公開(公告)日: | 2016-02-24 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 吳凱;李丹;程亮;王寶中;張琳 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 江蘇正大天創(chuàng)生物工程有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12N15/10 | 分類號(hào): | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 湯東鳳 |
| 地址: | 225300 江蘇省泰州市中國(guó)醫(yī)藥*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 應(yīng)用于 核酸 擴(kuò)增 體系 保護(hù) | ||
1.一種應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑,其特征在于,包括以下組份中的一種或多種:海藻糖、焦磷酸二乙酯處理過的水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑,其特征在于,所述核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑進(jìn)一步包括以下組分:蔗糖和/或乳糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑,其特征在于,所述核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑不包括甘露醇。
4.一種如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:將所述組份按照使用的濃度比混勻,即得到凍干保護(hù)劑。
5.一種如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1:將所述組份按照使用的濃度比混勻;
步驟2:冷凍干燥,即得到凍干保護(hù)劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑的制備方法,其特征在于,所述冷凍干燥的步驟,進(jìn)一步包括以下子步驟:
子步驟1:干燥的步驟;
子步驟2:凍干的步驟;
所述子步驟1中,凍干劑和核酸擴(kuò)增反應(yīng)試劑的體積比為3.5-7:13-16.5,所述核酸擴(kuò)增反應(yīng)試劑為RNA或DNA實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)試劑;
所述子步驟1中,所述干燥的步驟采用冷凍真空干燥;
所述步驟2中,所述凍干的方法包括以下階段:
預(yù)凍階段:隔板溫度下降到-45℃--55℃,保持時(shí)間3-5h;
一次升華階段:保持2-4h;
二次升華階段:保持2-4h;
終干燥階段:保持2-3h。
7.一種如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑的使用方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1:將用于核酸擴(kuò)增體系的酶混合液、核酸擴(kuò)增反應(yīng)液、低溫凍干保護(hù)液將按照對(duì)應(yīng)的濃度比混勻,即得到用于核酸擴(kuò)增體系的組合物;
步驟2:冷凍干燥,即得到凍干狀態(tài)的用于核酸擴(kuò)增體系的組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑的使用方法,其特征在于,所述冷凍干燥的步驟,進(jìn)一步包括以下子步驟:
子步驟1:干燥的步驟;
子步驟2:凍干的步驟;
所述子步驟1中,凍干劑和核酸擴(kuò)增反應(yīng)試劑的體積比為3.5-7:13-16.5,所述核酸擴(kuò)增反應(yīng)試劑為RNA或DNA實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)試劑;
所述子步驟1中,所述干燥的步驟采用冷凍真空干燥;
所述步驟2中,所述凍干的方法包括以下階段:
預(yù)凍階段:隔板溫度下降到-45℃--55℃,保持時(shí)間3-5h;
一次升華階段:保持2-4h;
二次升華階段:保持2-4h;
終干燥階段:保持2-3h。
9.一種包括如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑的檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述檢測(cè)試劑盒能夠在常溫下運(yùn)輸和/或保存。
10.一種如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑和/或如權(quán)利要求4-6中任一項(xiàng)所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑的制備方法和/或如權(quán)利要求7-8中任一項(xiàng)所述應(yīng)用于核酸擴(kuò)增體系的凍干保護(hù)劑的使用方法,在核酸擴(kuò)增體系的制備及使用中的應(yīng)用。
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