[發明專利]月見草素B-酪蛋白磷酸肽-殼聚糖納米粒及制備方法與應用

有效

• 申請號: 201510901621.1
• 申請日: 2015-12-08
• 公開（公告）號: CN105381472B
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發明（設計）人: 趙力超;曹庸;陳運嬌;曹素芳;鐘穎兒;劉梓韜
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: A61K47/55
• 分類號: A61K47/55;A61K47/61;A61K47/64;A61K38/01;A61K31/722;A61K31/7024;A61P39/06;C08J3/24;A23L33/18;A23L33/105
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

本發明公開了一種月見草素B?酪蛋白磷酸肽?殼聚糖納米粒及制備方法與應用。本發明通過配制CPPs溶液、CS溶液和OEB溶液，將這三種溶液按一定的添加順序混合均勻，控制最終溶液中CPP和OEB占三者的質量分數，且溶液中三者總和終濃度，再調節體系的pH值，得到納米小球；然后加入京尼平對小球進行固定，得到納米混懸液，離心，干燥，得到月見草素B?酪蛋白磷酸肽?殼聚糖納米粒。該納米粒具有粒徑可調、包埋率高、pH響應、綠色、節能、安全、抗胃酸、緩釋等優點，可在制藥領域、食品領域和保健品領域中進行廣泛應用。

技術領域

本發明涉及一種抗氧化水溶性大環二聚體鞣質納米緩釋技術開發，特別涉及一種月見草素B-酪蛋白磷酸肽-殼聚糖納米粒及制備方法與應用。

背景技術

隨著科學技術不斷進步和人民生活水平不斷提高，人類對食品的要求已從色、香、味，向營養、保健方向轉變。在功能性食品的研究和開發熱潮中，抗氧化類產品因具有獨特的有效抑制自由基的氧化反應而備受關注。人體內一定量的自由基對于傳遞能量、殺滅細菌和寄生蟲、或參與排除毒素具有重要作用。但在環境污染、工作壓力日趨加重的今天，體內自由基會受到各種誘導而超過了生命所能正常保持平衡的標準。雖然人體能通過自身調節耐受輕度的氧化應激，但嚴重應激情況則需要補充抗氧化劑來補救。因此在食品營養學領域，抗氧化研究熱點在于高含量、高活力抗氧化活性成分的發掘，以及如何提高現有抗氧化能力明確的活性物質在體內的生物利用度。

OEB是大環二聚體單寧中的一種，因其發現于月見草，國內又稱為月見草素B、月見草鞣質。大量研究表明OEB具有較強的抗氧化、抗腫瘤活性與免疫調節作用，以及作為抑制劑抑制糖苷酶活性從而起到降血糖的作用。桉樹是重要的木制品原材料，采伐期留下大量的樹葉幾乎未加利用就被廢棄，桉葉醇提物中大量OEB的發現為該物質的進一步開發提供了可能性。到目前為止，日本已有利用桉葉提取物用于食品抗氧化劑的相關研究，我國也有利用桉葉作為飼料及飼料添加劑的報道。這些都為桉葉OEB用于抗氧化功能食品提供了支持。但OEB的分子量大、穩定性差、易被消化酶降解等缺點決定了其作為口服功能保健產品具有多重吸收屏障。因此，如何利用新技術克服這些吸收屏障是提高OEB口服生物利用度的關鍵所在。

聚電解質納米技術是指以兩種帶相反電荷的電解質為原料，在靜電力作用下自組裝構建具有載體功能的納米尺寸復合物(polyelectrolyte complexes，PECs)。該技術的出現成為解決大分子活性物低口服生物利用度的問題一種有效途徑。由于納米小球的微小體積和特殊結構(10～1000nm)，在胃腸道能成批地被轉運，因此除具備傳統活性物輸送體系所具有的諸如提高活性物的溶解度、增加藥物穩定性以及緩釋等優點。材料的選擇是該技術重點內容之一，以往報道的一些聚電解質納米粒的構建涉及使用具有潛在毒性溶劑、不可降解材料、有爭議的可生物降解聚合物，增加了口服利用的難度。而理想的最終納米產品應該是具有生物相容性、生物可吸收性、生物降解性、無色、無味，并且是Generallyrecognized as safe(GRAS)級別。這就需要一些更為安全的食品級大分子來應對這一挑戰。同時，針對包埋的活性物應有更為突出的承載效果和靶向傳遞效果。殼聚糖，是以氨基葡萄糖和少量N-乙酰氨基葡萄糖為單元，通過β-1,4糖苷鍵連接而成的線性高分子，是自然界中罕見的正電聚電解質。源于殼聚糖的陽離子特性，殼聚糖在生理pH條件下，具有很強的生物黏附性和對吸收率的提高作用。酪蛋白磷酸肽對人體無副作用，且具有多種功能，如促進鈣吸收等，已被用作食品原料和治療藥物。在工業生產中，酪蛋白磷酸肽是以牛乳酪蛋白為原料，經胰蛋白酶水解分離純化而得到的一類富含磷酸絲氨酸的生物活性肽。盡管酪蛋白磷酸肽的作用機制和構效關系仍未明確，但眾多研究表明，在CPPs的氨基酸序列中，有一段由3個磷酸絲氨酸后跟2個谷氨酸殘基組成的高度酸性的極性序列，因序列中的正電荷的陽離子被螯合，產生了一個陰離子域。因此，帶負電荷的CPPs能與帶正電基團的電解質(如殼聚糖)相互作用，有效地結合在一起。總而言之，殼聚糖(CS)和酪蛋白磷酸肽(CPP)是兩種帶相反電荷的生物聚合物，具有極好的生物降解性、生物相容性和生物活性，在構成納米粒子給藥系統的材料中，是兩種種理想選擇。