[發(fā)明專利]一種消化酶組合物及成纖維細(xì)胞和飼養(yǎng)層細(xì)胞的制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510889246.3 | 申請日： | 2015-12-04 |
| 公開（公告）號： | CN105316309A | 公開（公告）日： | 2016-02-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 陳海佳;葛嘯虎;王一飛;羅二梅;張維敏 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣州賽萊拉干細(xì)胞科技股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/76 | 分類號： | C12N9/76;C12N9/64;C12N5/071;C12N5/073 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227 | 代理人： | 趙青朵 |
| 地址： | 510000 廣東省廣州市國*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 消化酶 組合 纖維 細(xì)胞 飼養(yǎng) 制備 方法 | ||
1.一種消化酶組合物，其特征在于，包括胰蛋白酶和分散酶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的消化酶組合物，其特征在于，以酶活力單位U計，所述胰蛋白酶與所述分散酶的酶活力比值為(1000～2000)：(1～10)。
3.如權(quán)利要求1或2所述的消化酶組合物在制備成纖維細(xì)胞中的應(yīng)用。
4.一種成纖維細(xì)胞的制備方法，其特征在于，包括：
將動物胚胎剪碎，加入胰蛋白酶和分散酶進(jìn)行消化，終止消化后去除未消化的組織，獲得成纖維細(xì)胞。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述消化的時間為15～20min。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述胚胎為胚胎軀干。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述動物胚胎為胎齡為10～15天的小鼠胚胎。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，以酶活力單位U計，所述胰蛋白酶的用量為1000～2000U/胚胎，所述分散酶的用量為1～10U/胚胎。
9.一種飼養(yǎng)層細(xì)胞的制備方法，其特征在于，包括：
將動物胚胎剪碎，加入胰蛋白酶和分散酶進(jìn)行消化，終止消化后去除未消化的組織，獲得成纖維細(xì)胞；
采用絲裂霉素C處理所述成纖維細(xì)胞，經(jīng)消化、細(xì)胞培養(yǎng)，獲得飼養(yǎng)層細(xì)胞。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，細(xì)胞培養(yǎng)為在37℃、體積分?jǐn)?shù)為5％的CO2條件下培養(yǎng)24h。
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