[發明專利]從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法及其應用

在審

• 申請號: 201510888276.2
• 申請日: 2015-12-06
• 公開（公告）號: CN105412735A
• 公開（公告）日: 2016-03-23
• 發明（設計）人: 張耀洲;龐莉;蓋其靜;杜思邈
• 申請（專利權）人: 正源堂（天津）生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/902
• 分類號: A61K36/902;A61P35/00;A61K125/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)超低溫粉碎：取干燥的三棱為原料，進行超微粉碎5～20min，得到超微粉；

(2)乙酸乙酯提取：在超微粉中加入乙酸乙酯，超微粉與乙酸乙酯的料液比為1︰(8～10)，70～75℃加熱1～3小時進行提取，離心取沉淀重復1～3次，合并提取的上清并濃縮干燥，為粗提組分；

(3)色譜分離：

(a)一維分離：取粗提組分用40％乙醇-正己烷溶液20～60℃超聲溶解至濃度為60～100mg/ml，過膜后通過高壓制備液相色譜進行分離，采用的色譜柱為Silica正相硅膠色譜柱，采用A流動相為正己烷、B流動相為乙醇的二元流動相體系，進樣量為100～150mL/針，流動相流速為550～600mL/min，洗脫方式為B相濃度由0％至30％梯度洗脫，檢測波長為210～280nm，根據紫外吸收光譜收集10-17.5min洗脫液作為目的組分，經濃縮后真空冷凍干燥，得到一維液相組分；

(b)二維分離：取一維液相組分用40％乙醇-正己烷溶液20～60℃超聲溶解至濃度為60～100mg/ml，過膜后通過高壓制備液相色譜進行分離，采用的色譜柱為Silica正相硅膠色譜柱，采用A流動相為正己烷、B流動相為乙醇的二元流動相體系，進樣量為1～4mL/針，流動相流速為12～16mL/min，洗脫方式為B相濃度5％等度洗脫，檢測波長為210～280nm，根據紫外吸收光譜收集24.3-26min洗脫液作為目的組分，經濃縮后真空冷凍干燥，得到本發明抗腫瘤活性組分。

2.根據權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法，其特征在于：所述步驟(1)中超微粉碎時間為12min。

3.根據權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法，其特征在于：所述步驟(2)中乙酸乙酯提取的提取溫度為72℃。

4.根據權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法，其特征在于：所述步驟(2)中超微粉與乙酸乙酯的料液比為1︰8。

5.根據權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法，其特征在于：所述步驟(3)(a)中粗提組分溶解于40％乙醇-正己烷溶液的濃度為80mg/ml。

6.根據權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法，其特征在于：所述步驟(3)(a)一維分離中色譜柱的直徑為150mm，柱長為250mm，其中硅球粒徑為10μm，孔徑為10nm。

7.根據權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法，其特征在于：所述步驟(3)(b)二維分離中一維液相組分溶解于40％乙醇-正己烷溶液的濃度為80mg/ml。

8.根據權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法，其特征在于：所述步驟(3)(b)二維分離中色譜柱的直徑為20mm，柱長為250mm，其中硅球粒徑為10μm，孔徑為

9.權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法得到的抗腫瘤活性組分在制備抗肺癌藥物中的應用。

10.權利要求1所述的從三棱中提取抗腫瘤活性組分的方法得到的抗腫瘤活性組分在制備抗肝癌藥物中的應用。