[發(fā)明專利]一種用于治療仔豬流行性腹瀉的卵黃抗體口服劑及其制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510884902.0 | 申請日： | 2015-12-04 |
| 公開（公告）號： | CN105412923A | 公開（公告）日： | 2016-03-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 寧昆;劉佩紅;周錦萍;王建;張維誼;楊德全;齊新永;葛菲菲;李鑫 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海市動物疫病預(yù)防控制中心 |
| 主分類號： | A61K39/42 | 分類號： | A61K39/42;A61K45/06;A61P31/14;C07K16/10;C07K16/02;A61K35/741 |
| 代理公司： | 上海申匯專利代理有限公司 31001 | 代理人： | 林煒 |
| 地址： | 201103 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 治療 仔豬 流行性 腹瀉 卵黃 抗體 口服 及其 制備 方法 | ||
1.一種用于治療仔豬流行性腹瀉的卵黃抗體口服劑，其特征在于：含有以PEDV流行毒株保護(hù)性抗原基因COE蛋白免疫非免疫產(chǎn)蛋雞后收集的雞蛋卵黃中提取的卵黃抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于治療仔豬流行性腹瀉的卵黃抗體口服劑，其特征在于：由植物油、卵黃、山梨酸鉀、乙氧基喹啉、維生素、礦物質(zhì)和益生菌，在所述的口服劑中，所述的植物油的質(zhì)量百分比濃度為57%-60%，所述的的卵黃的質(zhì)量百分比濃度為37%-40%，所述的山梨酸鉀的質(zhì)量百分比濃度為0.25%，所述的乙氧基喹啉的質(zhì)量百分比濃度為0.25%，余量為所述的維生素、礦物質(zhì)和益生菌，所述的維生素、礦物質(zhì)和益生菌的質(zhì)量比為1:1:1，所述的卵黃是以PEDV流行毒株保護(hù)性抗原基因COE蛋白免疫非免疫產(chǎn)蛋雞后收集的雞蛋卵黃。
3.權(quán)利要求1所述的一種用于治療仔豬流行性腹瀉的卵黃抗體口服劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
采用豬流行性腹瀉病毒陽性病料，使用RT-PCR方法擴增保護(hù)性抗原基因COE，連接到原核表達(dá)載體，對COE蛋白進(jìn)行表達(dá)、純化，使用弗氏佐劑對蛋白進(jìn)行乳化，制備成免疫原；
利用制備的免疫原免疫非免疫蛋雞；
免疫后收集雞蛋，在無菌條件下收集卵黃，然后提取卵黃中的卵黃抗體；
運用蝕斑減數(shù)試驗測定卵黃抗體對PEDV病毒的中和抗體效價；
收集卵黃抗體效價在1:64以上的雞蛋，用75%酒精浸泡消毒20min-30min，晾干，打開雞蛋，分離蛋黃，將蛋黃制備成卵黃抗體口服劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于治療仔豬流行性腹瀉的卵黃抗體口服劑的制備方法，其特征在于：在步驟5）中，用蛋黃分離器將蛋黃分離開后，按照質(zhì)量百分比稱取植物油、卵黃、山梨酸鉀、乙氧基喹啉、維生素、礦物質(zhì)和益生菌，先將山梨酸鉀溶于卵黃中，攪拌均勾；將植物油水浴加熱到65~75℃，在植物油中添加乙氧基喹啉，然后將添加了乙氧基喹啉的植物油加入到卵黃液中，邊加入邊攪拌，完全乳化后加入維生素、礦物質(zhì)和益生菌，直至形成膏狀液體即可。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于治療仔豬流行性腹瀉的卵黃抗體口服劑的制備方法，其特征在于：步驟1)中，COE蛋白，其純度不低于85%，濃度不低于1mg/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于治療仔豬流行性腹瀉的卵黃抗體口服劑的制備方法，其特征在于：步驟2）中，免疫程序如下：首次免疫劑量為1ml/羽，首次免疫后2周、4周、8周分別進(jìn)行三次加強免疫，免疫劑量為2ml/羽。
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