[發(fā)明專利]一種低致敏性魚類過敏原小清蛋白、制備方法及其用途有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510883944.2 | 申請日: | 2015-12-04 |
| 公開(公告)號: | CN105384804B | 公開(公告)日: | 2019-10-29 |
| 發(fā)明(設計)人: | 蔡秋鳳;趙勇娟;曹敏杰;劉光明;張凌晶 | 申請(專利權)人: | 集美大學 |
| 主分類號: | C07K14/46 | 分類號: | C07K14/46;C07K1/107;A61K38/17;A61P37/08;A23L33/17 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 低致敏性 魚類 過敏原 蛋白 制備 方法 及其 用途 | ||
本發(fā)明公開了低致敏性魚類過敏原小清蛋白、制備方法及其用途。所述低致敏性魚類過敏原小清蛋白有3個氨基酸殘基的糖基化修飾,分別為第88位賴氨酸殘基、第97位賴氨酸殘基以及第108位賴氨酸殘基的糖基化修飾。還進一步,還有第46位賴氨酸殘基、第55位賴氨酸殘基以及第84位賴氨酸殘基的糖基化修飾。具有低致敏性的特點又保留了免疫原性。通過將小清蛋白與糖溶液混勻冷凍干燥,美拉德反應,復溶后進行脫糖處理即可制備得到。可用于制備預防過敏原致敏,特別是魚類過敏原致敏的藥物及其制備低致敏食品,特別是低致敏魚類相關食品。
技術領域
本發(fā)明涉及蛋白質領域,尤其涉及一種低致敏性魚類過敏原小清蛋白、制備方法及其用途。
背景技術
食品過敏是指食物中的某些物質(通常是蛋白質)攝入體內被機體免疫系統(tǒng)識別為外來物而發(fā)生的免疫變態(tài)反應。近年來,國內外食物過敏發(fā)病率明顯上升。據(jù)2015年的一項調查結果顯示,我國城市兒童的食物過敏率約為3.2%。魚類是八大類過敏食物之一,國內外學者對魚類過敏原的研究表明,分子量為10-14kDa的小清蛋白(parvalbumin,PV)廣泛存在于各類魚中,是魚類的主要過敏原。因此,降低魚肉中小清蛋白的致敏性對于生產(chǎn)低致敏性魚類食品以及預防魚類食物過敏具有重要的意義。
目前對影響小清蛋白致敏性的因素研究很少,多數(shù)是探討鈣離子的影響,通過去除鈣離子改變小清蛋白的構象,從而降低其致敏性。但這一作用被證實對天然小清蛋白的影響較小。國家發(fā)明專利“一種淡水魚小清蛋白過敏原抑制劑”(專利號ZL201410139704.7)是采用人工合成的小RNA化合物,注入魚肌肉局部,抑制小清蛋白的表達,從而降低魚肌肉中小清蛋白的含量。但該方法由于使用的是化學合成的核酸分子,在使用方面存在局限性。
目前常用的降低食物致敏性的方法是高壓處理或酶解,通過改變蛋白構象,掩藏或破壞抗原表位,但會損壞食品的質構和風味。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種低致敏性魚類過敏原小清蛋白。
為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供一種低致敏性魚類過敏原小清蛋白,其特征在于,有3個氨基酸殘基的糖基化修飾,分別為第88位賴氨酸殘基、第97位賴氨酸殘基以及第108位賴氨酸殘基的糖基化修飾。
進一步,還有第46位賴氨酸殘基、第55位賴氨酸殘基以及第84位賴氨酸殘基的糖基化修飾;
任選的,所述的糖基化修飾為葡萄糖或丙酮醛或吡咯琳或羧甲基或咪唑琳酮。
進一步,第46位賴氨酸殘基發(fā)生丙酮醛修飾;第55賴氨酸殘基發(fā)生葡萄糖,丙酮醛,吡咯琳修飾;第84賴氨酸殘基發(fā)生丙酮醛,吡咯琳,羧甲基,咪唑琳酮修飾;第88賴氨酸殘基發(fā)生丙酮醛,吡咯琳,羧甲基,咪唑琳酮修飾;第97賴氨酸殘基發(fā)生葡萄糖修飾;第108賴氨酸殘基發(fā)生咪唑琳酮修飾。
進一步,所述低致敏性魚類過敏原小清蛋白保留有免疫原性。
本發(fā)明另一方面,所述低致敏性魚類過敏原小清蛋白的制備方法,其特征在于,步驟為,
(1)將小清蛋白與糖溶液混勻冷凍干燥,
(2)美拉德反應得到反應產(chǎn)物,
(3)反應產(chǎn)物復溶后進行脫糖處理即可。
進一步,所述步驟(1)中的小清蛋白通過重組表達獲得或從魚肉中分離得到;
任選的,所述步驟(1)為用含有1mmol/L NaHCO3 20mmol/L,pH7.0的PBS溶液與糖配制糖溶液,真空冷凍干燥24小時;
優(yōu)選的,所述小清蛋白與糖的質量比為1:3-1:16;
優(yōu)選的,所述糖為葡萄糖或木糖。
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