[發(fā)明專利]一種低致敏性魚類過敏原小清蛋白、制備方法及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510883944.2
• 申請日: 2015-12-04
• 公開（公告）號: CN105384804B
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發(fā)明（設計）人: 蔡秋鳳;趙勇娟;曹敏杰;劉光明;張凌晶
• 申請（專利權）人: 集美大學
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;C07K1/107;A61K38/17;A61P37/08;A23L33/17
• 代理公司: 廈門市精誠新創(chuàng)知識產(chǎn)權代理有限公司 35218
• 代理人: 方惠春

本發(fā)明公開了低致敏性魚類過敏原小清蛋白、制備方法及其用途。所述低致敏性魚類過敏原小清蛋白有3個氨基酸殘基的糖基化修飾，分別為第88位賴氨酸殘基、第97位賴氨酸殘基以及第108位賴氨酸殘基的糖基化修飾。還進一步，還有第46位賴氨酸殘基、第55位賴氨酸殘基以及第84位賴氨酸殘基的糖基化修飾。具有低致敏性的特點又保留了免疫原性。通過將小清蛋白與糖溶液混勻冷凍干燥，美拉德反應，復溶后進行脫糖處理即可制備得到。可用于制備預防過敏原致敏，特別是魚類過敏原致敏的藥物及其制備低致敏食品，特別是低致敏魚類相關食品。

技術領域

本發(fā)明涉及蛋白質領域，尤其涉及一種低致敏性魚類過敏原小清蛋白、制備方法及其用途。

背景技術

食品過敏是指食物中的某些物質(通常是蛋白質)攝入體內被機體免疫系統(tǒng)識別為外來物而發(fā)生的免疫變態(tài)反應。近年來，國內外食物過敏發(fā)病率明顯上升。據(jù)2015年的一項調查結果顯示，我國城市兒童的食物過敏率約為3.2％。魚類是八大類過敏食物之一，國內外學者對魚類過敏原的研究表明，分子量為10-14kDa的小清蛋白(parvalbumin，PV)廣泛存在于各類魚中，是魚類的主要過敏原。因此，降低魚肉中小清蛋白的致敏性對于生產(chǎn)低致敏性魚類食品以及預防魚類食物過敏具有重要的意義。

目前對影響小清蛋白致敏性的因素研究很少，多數(shù)是探討鈣離子的影響，通過去除鈣離子改變小清蛋白的構象，從而降低其致敏性。但這一作用被證實對天然小清蛋白的影響較小。國家發(fā)明專利“一種淡水魚小清蛋白過敏原抑制劑”(專利號ZL201410139704.7)是采用人工合成的小RNA化合物，注入魚肌肉局部，抑制小清蛋白的表達，從而降低魚肌肉中小清蛋白的含量。但該方法由于使用的是化學合成的核酸分子，在使用方面存在局限性。

目前常用的降低食物致敏性的方法是高壓處理或酶解，通過改變蛋白構象，掩藏或破壞抗原表位，但會損壞食品的質構和風味。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種低致敏性魚類過敏原小清蛋白。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種低致敏性魚類過敏原小清蛋白，其特征在于，有3個氨基酸殘基的糖基化修飾，分別為第88位賴氨酸殘基、第97位賴氨酸殘基以及第108位賴氨酸殘基的糖基化修飾。

進一步，還有第46位賴氨酸殘基、第55位賴氨酸殘基以及第84位賴氨酸殘基的糖基化修飾；

任選的，所述的糖基化修飾為葡萄糖或丙酮醛或吡咯琳或羧甲基或咪唑琳酮。

進一步，第46位賴氨酸殘基發(fā)生丙酮醛修飾；第55賴氨酸殘基發(fā)生葡萄糖，丙酮醛，吡咯琳修飾；第84賴氨酸殘基發(fā)生丙酮醛，吡咯琳，羧甲基，咪唑琳酮修飾；第88賴氨酸殘基發(fā)生丙酮醛，吡咯琳，羧甲基，咪唑琳酮修飾；第97賴氨酸殘基發(fā)生葡萄糖修飾；第108賴氨酸殘基發(fā)生咪唑琳酮修飾。

進一步，所述低致敏性魚類過敏原小清蛋白保留有免疫原性。

本發(fā)明另一方面，所述低致敏性魚類過敏原小清蛋白的制備方法，其特征在于，步驟為，

(1)將小清蛋白與糖溶液混勻冷凍干燥，

(2)美拉德反應得到反應產(chǎn)物，

(3)反應產(chǎn)物復溶后進行脫糖處理即可。

進一步，所述步驟(1)中的小清蛋白通過重組表達獲得或從魚肉中分離得到；

任選的，所述步驟(1)為用含有1mmol/L NaHCO₃ 20mmol/L，pH7.0的PBS溶液與糖配制糖溶液，真空冷凍干燥24小時；

優(yōu)選的，所述小清蛋白與糖的質量比為1:3-1:16；

優(yōu)選的，所述糖為葡萄糖或木糖。