[發(fā)明專利]一種自生固氮菌MBC5及其應用

有效

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• 申請日: 2015-11-30
• 公開（公告）號: CN105255796B
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發(fā)明（設計）人: 張宇清;邵晨曦;秦樹高;馮薇;吳斌
• 申請（專利權）人: 北京林業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C09K17/00;C09K105/00;C12R1/01
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

本發(fā)明公開了一種自生固氮菌(Massilia albidiflava)MBC5，其保藏號為CGMCC No.10821，保藏日期為2015年5月19日，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。該菌株在干旱、大溫差、鹽堿災害和強烈的紫外線輻射下依然能夠生存繁殖并具有固氮活性。其制成的菌劑能夠施用于干旱、大溫差、鹽堿災害和高紫外線輻射的生態(tài)系統(tǒng)，并且能夠增加這些生態(tài)系統(tǒng)的氮素積累，可以起到改良土壤環(huán)境的作用，提高微生物和植物的生理活性，增加凈初級生產(chǎn)力。

技術領域

本發(fā)明屬于生物固氮領域，具體涉及一種自生固氮菌MBC5及其應用。

背景技術

荒漠生態(tài)系統(tǒng)占全球面積的41％(Delgado-Baquerizo，et al.，2013)，其凈初級生產(chǎn)力約占陸地生態(tài)系統(tǒng)生產(chǎn)力的20％(Whittaker，1975)。在荒漠生態(tài)系統(tǒng)當中，土壤氮素養(yǎng)分的匱乏嚴重地限制了系統(tǒng)凈初級生產(chǎn)力(Asner，et al.，2003，Crutsinger，et al.，2013，Reich，et al.，2006)。而且荒漠化還在進一步發(fā)展，導致了土地退化，氮素養(yǎng)分流失嚴重。

自然環(huán)境中的氮素輸入方式主要為生物固氮。固氮作用增加土壤可利用氮含量，為微生物和植物補充氮素促進其生長和代謝，以增加生態(tài)系統(tǒng)的初級生產(chǎn)力，并且對于生態(tài)系統(tǒng)的氮素循環(huán)也有著至關重要的作用。生物固氮主要有共生固氮和自生固氮。由于荒漠地區(qū)環(huán)境條件惡劣，植被稀少，因此可以進行共生固氮的豆科植物也十分稀少，自生固氮是荒漠生態(tài)系統(tǒng)主要的氮素輸入方式。因此，自生固氮對于荒漠化防治工作和荒漠生態(tài)系統(tǒng)的恢復有重大意義。

為了幫助荒漠化防治工作，對于荒漠土壤自生固氮菌的研究和應用迫在眉睫。目前對于固氮細菌的報道仍以共生固氮菌為主，對于自生固氮菌的報道非常少。而且這些少量已知的自生固氮菌劑對環(huán)境溫度和濕度等環(huán)境條件均有要求，抗逆性較差，多應用于農(nóng)田或者堆肥當中，不適于環(huán)境條件惡劣的荒漠生態(tài)系統(tǒng)。

因此有必要提供一種抗逆性強、適用于荒漠生態(tài)系統(tǒng)的具有自生固氮能力的固氮菌株。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種適用于干旱、溫差大、鹽堿災害和高紫外線強度并且可以自生固氮的菌株，以增加土壤固氮活性和有效氮含量。

為達到以上目的，本發(fā)明提供了一種自生固氮菌(Massilia albidiflava)MBC5，其保藏號為CGMCC No.10821，保藏日期為2015年5月19日，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。

上述菌株為Massilia albidiflava。菌株Massilia albidiflava(菌種名)-MBC5(菌株名)，是將荒漠地區(qū)的表層土壤用無菌裝置采集低溫條件在帶回實驗室，經(jīng)過分離、純培養(yǎng)，革蘭氏染色、固氮活性檢測和16srDNA測序所得。

形態(tài)特性：該菌株在格蘭仕染色切片上觀察看到細胞呈單個，直的桿菌，不是螺旋狀。無鞭毛，不產(chǎn)生鞘或凸起物，沒有休止階段，不形成芽胞，無莢膜，格蘭仕陰性。

培養(yǎng)特性：該菌株在阿須貝培養(yǎng)基上于28℃-30℃培養(yǎng)48h后，生長良好，專性需氧。菌落形態(tài)各異，多數(shù)直徑1cm，圓形、凸起、邊緣不整齊。

生理特性：NaCl(50g/L,30℃)生長實驗樣性，吡咯烷基方胺酶實驗樣性、半定量觸酶實驗樣性，氧化酶陰性，吲哚陰性，拉絲試驗陰性，硝酸鹽還原陰性，脲酶陰性。

功能特性：通過斜面阿須貝培養(yǎng)基培養(yǎng)，用乙炔還原法測定，該菌株表現(xiàn)出了固氮活性。

本發(fā)明還提供了含有所述自生固氮菌MBC5的菌劑。所述菌劑可以為液體菌劑，也可以為固體菌劑。

可選的，所述菌劑中還含有菌體吸附材料，所述菌體吸附材料選自草炭、珍珠巖、蛭石粉和微粉碳酸鈣中的至少一種。