[發明專利]一種自生固氮菌MBC5及其應用

有效

• 申請號: 201510859663.3
• 申請日: 2015-11-30
• 公開（公告）號: CN105255796B
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發明（設計）人: 張宇清;邵晨曦;秦樹高;馮薇;吳斌
• 申請（專利權）人: 北京林業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C09K17/00;C09K105/00;C12R1/01
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種自生固氮菌(Massilia albidiflava)MBC5，其保藏號為CGMCCNo.10821，保藏日期為2015年5月19日，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。

2.含有權利要求1所述自生固氮菌MBC5的菌劑。

3.根據權利要求2所述的菌劑，其特征在于，所述菌劑中還含有菌體吸附材料，所述菌體吸附材料選自草炭、珍珠巖、蛭石粉和微粉碳酸鈣中的至少一種。

4.根據權利要求3所述的菌劑，其特征在于，所述菌體吸附材料為草炭。

5.根據權利要求4所述的菌劑，其特征在于，在所述菌劑中，自生固氮菌MBC5的含量為2.1×10⁸-2.9×10⁸cfu/g。

6.根據權利要求5所述的菌劑，其特征在于，在所述菌劑中，自生固氮菌MBC5的含量為2.9×10⁸cfu/g。

7.根據權利要求2-6中任意一項所述的菌劑，其特征在于，所述菌劑的pH值為6.8-7.2。

8.權利要求2-7中任意一項所述的菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

將所述自生固氮菌MBC5接種于一級斜面培養基中，在28-30℃培養3-5天，獲得一級菌株；將所述一級菌株接種于二級液體培養基中，在28-30℃條件下震蕩培養2-3天，獲得二級菌株；將所述二級菌株接種于三級固體培養基中，在28-30℃條件下培養在1-2天后獲得三級菌株；將所述三級菌株與菌體吸附材料按照菌劑中自生固氮菌MBC5的含量為2.1×10⁸-2.9×10⁸cfu/g的配比混勻后獲得菌劑；

其中，所述一級斜面培養基的配方為：KH₂PO₄ 0.2g/L，MgSO₄ 0.2g/L，NaCl 0.2g，CaCO₃5.0g，甘露醇10.0g，CaSO₄ 0.1g，pH7.0，瓊脂20g，蒸餾水1000mL；

二級液體培養基的配方為：KH₂PO₄ 0.2g/L，MgSO₄ 0.2g/L，NaCl 0.2g，CaCO₃ 5.0g，甘露醇10.0g，CaSO₄ 0.1g，pH7.0，蒸餾水1000mL；

三級固體培養基的配方為：甘露醇10.0g，酵母粉1.0g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，K₂HPO₄ 0.5g，NaCl 0.1g，CaCl₂ 0.05g，Rh微量元素液4.0mL，瓊脂20g，H₂O 1000mL，pH6.8-7.0。

9.權利要求1所述的自生固氮菌MBC5或權利要求2-7中任意一項所述的菌劑在土壤改良中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，包括將所述菌劑和砂土按質量比1：9-11混合均勻后施用于土壤表面。

11.根據權利要求9或10所述的應用，其特征在于，所述菌劑的用量為420-560g菌劑/畝。