[發明專利]一種甲狀腺球蛋白(TG)測試試劑盒及其測試方法

在審

• 申請號: 201510834618.2
• 申請日: 2015-11-26
• 公開（公告）號: CN105510593A
• 公開（公告）日: 2016-04-20
• 發明（設計）人: 朱馳;王鍵
• 申請（專利權）人: 北京豪邁生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543
• 代理公司: 北京奧翔領智專利代理有限公司 11518
• 代理人: 路遠

技術領域

本發明涉及測定血清的試劑盒及其測試方法，尤其是涉及測定血清中甲狀腺球蛋 白含量的試劑盒及其測試方法。

背景技術

甲狀腺球蛋白(Thyroglobulin，TG)，是甲狀腺濾泡上皮分泌的660ku糖蛋白，每個 TG約有2個甲狀腺素(T4)和0.5個三碘甲腺原氨酸(T3)分子，儲存在濾泡腔中。溶酶體水解 TG表面T4、T3并使之釋放入血，同時少量的TG也釋放入血，部分TG經甲狀腺淋巴管分泌入 血。血循環中的TG被肝臟的巨噬細胞清除。血清TG的改變較多見于甲狀腺部位的惡性腫瘤， 如TG在甲狀腺濾泡狀癌、甲狀腺乳頭狀癌和間變癌都可出現不同程度的升高；而甲狀腺髓 樣癌血TG可正常或降低。前者主要是因為甲狀腺的破壞以及腫瘤組織分泌一定量的TG，而 致血中TG升高；后者的腫瘤組織來源于甲狀腺C細胞，而非甲狀腺上皮細胞，故其血清TG并 不升高。甲狀腺功能亢進癥、甲狀腺瘤、亞急性甲狀腺炎以及慢性淋巴細胞性甲狀腺炎等甲 狀腺疾病都可出現血中TG水平升高。從檢測的角度上來說，目前臨床上用于測定TG的方法 主要放免法、ELISA法、化學發光法等。

過去以放免為代表的甲狀腺球蛋白(TG)測定試劑盒受方法學的限制，其靈敏度和 抗干擾能力嚴重不足，存在很大的弊端，已基本上退出市場；酶聯免疫法(ELISA)作為定性 檢測的方法，抗原、抗體的結合反應是在固相(ELISA板反應孔)表面進行的，其靈敏度、特異 性均較好，且經濟實惠，所以是應用得最廣、最多的方法。化學發光法其靈敏度高，從化學角 度和自動化程度看，化學發光法優于酶聯免疫法。這些方法雖然都有很多優點，但在檢測的 靈敏度、特異性、穩定性、檢測用時等方面還有待進一步提高。

發明內容

有鑒于此，本發明所要解決的技術問題是克服上述現有技術的不足，提供一種特 異性強，靈敏度高，獲得檢測結果的時間短，操作方式簡便，檢測結果穩定可靠的甲狀腺球 蛋白(TG)的測試試劑盒及其測試方法。

為達到上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種甲狀腺球蛋白測試試劑盒，該試劑盒由磁分離試劑，試劑R₁，試劑R₂，標準品， 質控品，校準品，清洗濃縮液，稀釋液及發光底物組成，其中：磁分離試劑：標記有小鼠抗人 TG的單克隆抗體的納米磁性微球，所述標記有小鼠抗人TG的單克隆抗體的納米磁性微球濃 度為167μg/ml；試劑R₁：含有堿性磷酸酶標記的TG抗體，所述堿性磷酸酶標記的TG抗體的濃 度為0.3μg/ml；試劑R₂：含有牛γ球蛋白質組分的緩沖液；標準品，質控品和校準品：含有一 定量TG抗原的小牛血清溶液，所述標準品的濃度為0(S0)、2(S1)、10(S2)、100(S3)、250 (S4)、500(S5)ng/ml，所述質控品濃度為6,250ng/ml，所述校準品濃度為10,250ng/ml；清洗 濃縮液：含有Tween-20和Proclin-300的緩沖液；稀釋液：含有小牛血清的溶液；發光底物： 金剛烷的衍生物IUMIPHOS530，所述金剛烷的衍生物IUMIPHOS530的濃度為10μg/ml；

一種甲狀腺球蛋白測試試劑盒，由下述體積分數組成的：磁分離試劑4％-6％，試 劑R₁6％-8％，試劑R₂6％-8％，標準品4％-6％，質控品1％-3％，校準品2％-4％，清洗濃縮液 15％-30％，稀釋液10％-25％，發光底物25％-40％。

優選地，所述試劑盒由下述體積分數組成：磁分離試劑4％，試劑R₁6％，試劑R₂6％， 標準品4％，質控品1％，校準品4％，清洗濃縮液15％，稀釋液25％，發光底物35％。

優選地，所述試劑盒由下述體積分數組成：磁分離試劑4.76％，試劑R₁7.14％，試 劑R₂7.14％，標準品4.76％，質控品1.59％，校準品3.17％，清洗濃縮液23.82％，稀釋液 15.87％，發光底物31.75％。

優選地，所述試劑盒由下述體積分數組成：磁分離試劑6％，試劑R₁8％，試劑R₂8％， 標準品6％，質控品3％，校準品2％，清洗濃縮液30％，稀釋液10％，發光底物27％。

所述試劑盒中各組分按照如下制備方法制得：

第一步：磁分離試劑的制備過程