[發明專利]坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型及其在用于篩選鎮痛抗腫瘤藥物中的應用

在審

• 申請號: 201510833237.2
• 申請日: 2015-11-25
• 公開（公告）號: CN105457043A
• 公開（公告）日: 2016-04-06
• 發明（設計）人: 丁罡;姜峰;葉品;胡薇薇;李靜
• 申請（專利權）人: 上海市崇明新華癌痛轉化研究所
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A01K67/02
• 代理公司: 青島致嘉知識產權代理事務所(普通合伙) 37236
• 代理人: 劉曉

1.坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型，其特征在于它通過以下制備方法制得：

（1）、制備腫瘤細胞：將Walker256腫瘤細胞與生理鹽水混勻形成細胞懸液；

取雌性健康Wistar大鼠，每只大鼠腹腔內注射所述Walker256腫瘤細胞懸液，將大鼠飼養至大鼠的腹部出現明顯的膨隆，抽出大鼠的腹水，離心棄去上清后，加入適量生理鹽水，制備成濃度為1×10⁸個/ml的體內活化的新鮮Walker256腫瘤細胞懸液，2～3小時內使用；

（2）、腫瘤細胞皮下植入：選取雌性健康Wistar大鼠，對其左側腋窩處徹底消毒，吸取所述新鮮Walker256腫瘤細胞懸液接種于大鼠左側腋窩皮下，以形成明顯皮丘為宜；

（3）、坐骨神經結扎：將大鼠稱重后，經麻醉后取俯臥位，剃除毛發，用碘酊和消毒酒精消毒，在坐骨神經三叉分支的近端5mm處，用手術縫合線做三道結扎，每道結扎之間間距1mm，以不影響神經外膜的血運為度，逐層關閉刀口，縫合皮膚前后分別消毒；大鼠恢復3-5天，注意觀察避免傷口發炎。

2.根據權利要求1所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型，其特征在于：所述步驟（1）中選取的雌性健康Wistar大鼠體重60～80g。

3.根據權利要求1所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型，其特征在于：所述步驟（1）中每只大鼠腹腔內注射所述Walker256腫瘤細胞懸液2ml，其濃度為1×10⁸個/ml。

4.根據權利要求1所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型，其特征在于：所述步驟（1）中將大鼠飼養7天后至大鼠的腹部出現明顯的膨隆。

5.根據權利要求1所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型，其特征在于：所述步驟（2）中選取的雌性健康Wistar大鼠體重175~185g。

6.根據權利要求1所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型，其特征在于：所述步驟（2）中吸取所述新鮮Walker256腫瘤細胞懸液0.5ml接種于大鼠左側腋窩皮下。

7.權利要求1-6任一項所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型在用于篩選鎮痛抗腫瘤藥物中的應用。

8.根據權利要求7所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型在用于篩選鎮痛抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于：將待篩選的鎮痛抗腫瘤藥物腹腔注射于所述坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型，給藥后1小時，對大鼠的自發痛、機械痛閾和熱痛閾疼痛指標進行檢測。

9.根據權利要求7所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型在用于篩選鎮痛抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于：將待篩選的鎮痛抗腫瘤藥物腹腔注射于坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型，每日注射2次，連續注射7日，對成瘤率、大鼠的體重和腫瘤體積進行檢測。

10.根據權利要求8或9所述的坐骨神經結扎皮下荷瘤大鼠模型在用于篩選鎮痛抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于：待篩選的鎮痛抗腫瘤藥物的注射量為5mg/kg~10mg/kg。