[發(fā)明專利]一種抗動脈硬化魷魚蛋白質(zhì)短肽的分離方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510825614.8 | 申請日： | 2015-11-25 |
| 公開（公告）號： | CN105349604A | 公開（公告）日： | 2016-02-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 楊勁峰;吳文惠;孟嘵琴;包斌 | 申請（專利權(quán)）人： | 榮成廣潤水產(chǎn)食品有限公司 |
| 主分類號： | C12P21/06 | 分類號： | C12P21/06;C07K1/16 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 264309 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 動脈硬化 魷魚 蛋白質(zhì) 分離 方法 | ||
1.一種抗動脈硬化魷魚蛋白質(zhì)短肽的分離方法，其特征在于：經(jīng)過下列工藝步驟：
(1)原料預(yù)處理：選取新鮮的魷魚內(nèi)臟為原料，放入組織搗碎機(jī)中搗碎，按照1︰1～3的比例加入去離子水，混勻，得魷魚內(nèi)臟漿液；
(2)酶解：將步驟(1)中得到的魷魚內(nèi)臟漿液放入容器中，加入酶活力0.5～1萬U的蛋白酶，置于預(yù)熱的恒溫水浴鍋中，恒溫溫度為55±5℃，計(jì)時酶解；酶解完畢后，將酶解液置于沸水浴中加熱滅酶10-15min，冷卻至室溫后，控溫離心，得到魷魚內(nèi)臟酶解液；
(3)酶解液分離：將步驟(2)中得到的魷魚內(nèi)臟酶解液用去離子水溶解，采用HP-20樹脂柱進(jìn)行層析，依次以水、20%、60%、80%的甲醇溶液對酶解液進(jìn)行梯度洗脫，收集甲醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得魷魚內(nèi)臟短肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗動脈硬化魷魚蛋白質(zhì)短肽的分離方法，其特征在于：其還經(jīng)過下列工藝步驟：
(4)抗動脈硬化活性評價：將步驟(3)得到的魷魚內(nèi)臟短肽進(jìn)行HMG-CoA還原酶抑制活性評價。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗動脈硬化魷魚蛋白質(zhì)短肽的分離方法，其特征在于：所述的蛋白酶為堿性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、動物蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗動脈硬化魷魚蛋白質(zhì)短肽的分離方法，其特征在于：所述的控溫離心是控制溫度4℃，離心機(jī)轉(zhuǎn)速控制6000～8000r/min，離心10～20min。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種抗動脈硬化魷魚蛋白質(zhì)短肽的分離方法，其特征在于：所述的HMG-CoA還原酶抑制活性評價，其方法為：圓底96孔平板孔內(nèi)注入2.5mmol/LHMG-CoA、2-8U/mgHMG-CoA還原酶、10mmol/LNADPH和魷魚內(nèi)臟短肽，構(gòu)成50μL的反應(yīng)體系；在37℃于337nm處每隔4min連續(xù)測定80min，通過NADPH吸光度的變化以評定魷魚內(nèi)臟短肽對HMG-CoA還原酶的抑制作用；
其HMG-CoA還原酶抑制率的計(jì)算公式為：；
其中，在計(jì)算公式中，R為抑制率(%)；
Ki和KC分別為樣品和對照組的吸光度直線斜率。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于榮成廣潤水產(chǎn)食品有限公司，未經(jīng)榮成廣潤水產(chǎn)食品有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201510825614.8/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 上一篇：易清洗和厚薄易調(diào)的棉被
- 下一篇：可拆式皮帶展示架
