[發明專利]用于膀胱癌檢測的邏輯與門基因線路的構建方法在審
| 申請號： | 201510824077.5 | 申請日： | 2015-11-24 |
| 公開（公告）號： | CN105400816A | 公開（公告）日： | 2016-03-16 |
| 發明（設計）人： | 周慶;黃衛人;劉宇辰;周澤強;蔡志明 | 申請（專利權）人： | 深圳市第二人民醫院 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281 | 代理人： | 向武橋 |
| 地址： | 518037 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 膀胱癌 檢測 邏輯 與門 基因 線路 構建 方法 | ||
1.一種用于膀胱癌檢測的邏輯與門基因線路的構建方法，其特征在于，
a)用PCR方法擴增序列：如SEQIDNO:1所示的hUPII啟動子序列，如SEQIDNO:2所示的氨酰tRNA合成酶AcKRS基因序列，SEQIDNO:3所示的hTERT啟動子序列，如SEQIDNO:4所示的tRNA序列，如以SEQIDNO:5所示的pCMV6-AC-GFP質粒序列為模板PCR擴增SEQIDNO:6所示的pCMV6-AC-GFP37TAG質粒序列；
b)將所述hUPII啟動子與AcKRS基因，所述hTERT啟動子與tRNA分別連接到如SEQIDNO:7所示的psiCHECK-2質粒中構建重組載體；
c)將所述重組載體與所述pCMV6-AC-GFP37TAG質粒，共同轉入膀胱癌細胞，構建出所述基因線路。
2.如權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述膀胱癌細胞是5637。
3.如權利要求1或2所述的構建方法，其特征在于，所述步驟c)中，將含有UAG終止密碼子的效應基因一起轉入所述膀胱癌細胞。
4.如權利要求3所述的構建方法，其特征在于，所述效應基因是綠色熒光蛋白GFP。
5.一種膀胱癌檢測試劑盒，其特征在于，包括序列如SEQIDNO:8所示的psiCHECK-2-hUPII/AcKRS重組載體、序列如SEQIDNO:9所示的psiCHECK-2-hTERT/tRNA重組載體、序列如SEQIDNO:6所示pCMV6-AC-GFP37TAG質粒。
6.如權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，還包括含有UAG終止密碼子的效應基因。
7.如權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述效應基因是綠色熒光蛋白GFP。
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