[發明專利]高效液相色譜法檢測替格瑞洛中手性異構體含量的方法

在審

• 申請號: 201510812061.2
• 申請日: 2015-11-20
• 公開（公告）號: CN105301135A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: 褚巖鳳;孫春艷;石瑩;周培培;王建雯;繆世峰;陳令武
• 申請（專利權）人: 揚子江藥業集團有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 楊洲;蘇蕾

技術領域

本發明屬于藥物分析技術領域，具體涉及一種高效液相色譜法分離檢測替格瑞洛原料藥中手性異構體的方法。

背景技術

替格瑞洛(ticagrelor)是由英國阿斯利康制藥公司(AstraZeneca)研制開發的一種具有選擇性治療急性冠狀動脈綜合征(acutecoronarysyndrome，ACS)的新型小分子抗凝血藥物，是首個口服的可逆性二磷酸腺苷(ADP)受體拮抗劑，可以選擇性抑制二磷酸腺苷的關鍵靶受體P2Y₁₂。替格瑞洛含有6個手性中心，共有64個手性異構體，根據美國食品藥品監督管理局(FDA)對具有手性中心藥物的技術要求，需要對藥物的手性異構體進行控制，但是目前未見關于替格瑞洛異構體分析方法的報道。

發明內容

為保證臨床用藥的安全性，本發明人開發了一種高效液相色譜法分離檢測替格瑞洛原料藥中手性異構體的方法，對替格瑞洛原料藥中的異構體進行分析，從而保證藥物的安全性、質量可控性。

本發明的目的是提供一種高效液相色譜法分離和檢測替格瑞洛原料藥中手性異構體的方法，本發明建立的方法準確、重現性好，實現了對替格瑞洛手性異構體雜質的有效監控。

本發明是通過以下技術方案實現的：

本發明提供了一種替格瑞洛原料藥及其手性異構體的高效液相色譜法的分離檢測方法，其包括以下步驟：

1)取含有手性異構體的替格瑞洛原料藥適量，用乙醇制成每1ml約含2.0mg的樣品溶液；

2)取步驟1)中替格瑞洛樣品溶液適量，用乙醇制成每1ml約含4.0μg的對照溶液；

3)取1)、2)的溶液10μl，注入高效液相色譜儀，完成替格瑞洛異構體的測定；

其中，所述高效液相色譜條件如下：

以多糖衍生物涂敷型手性色譜柱為填料的色譜柱，優選地所述色譜柱為AD-H色譜柱，250mm×4.6mm×5μm；色譜柱柱溫38～42℃；

以正己烷、乙醇、三氟乙酸的混合溶劑作為流動相，優選地流動相中的正己烷、乙醇、三氟乙酸的體積比例為82～84:16～18:0.6～0.8；流動相流速為0.9～1.1ml/min；

采用紫外檢測器，檢測波長設置為250～260nm；

這里，所述手性異構體為以下七種結構所示的物質：

本發明提供的上述替格瑞洛原料藥及其手性異構體的高效液相色譜法的分離檢測方法，試驗結果表明，手性異構體雜質Y3、Y4、Y3’、Y2、Y4’、Y1、Y2’相對于替格瑞洛的校正因子分別為1.1、1.0、1.0、1.0、1.0、0.9，校正因子均在0.9～1.1范圍之內，可以采用不加校正因子主成分自身對照法進行計算。

在本發明的實施方案中，本發明提供的替格瑞洛原料藥及其手性異構體的高效液相色譜法的分離檢測方法，其中，所述流動相中的正己烷、乙醇、三氟乙酸的體積比例更優選地為83∶17：0.7。

在本發明的實施方案中，本發明提供的替格瑞洛原料藥及其手性異構體的高效液相色譜法的分離檢測方法，其中，所述流動相流速更優選地為1ml/min。

在本發明的實施方案中，本發明提供的替格瑞洛原料藥及其手性異構體的高效液相色譜法的分離檢測方法，其中，所述檢測波長為255nm。

在本發明的實施方案中，本發明提供的替格瑞洛原料藥及其手性異構體的高效液相色譜法的分離檢測方法，其中，所述色譜柱柱溫為38℃、40℃、或42℃。

根據現有技術中替格瑞洛的合成路線以及化合物的結構特點進行分析，替格瑞洛需要控制7個異構體雜質，本發明采用手性柱高效液相色譜分離測定其手性異構體，采用不加校正因子的主成分自身對照法對雜質進行定量；該方法操作簡便易行，試驗結果證明選用的色譜條件能較好地分離主成分及其手性異構體，更好地監控替格瑞洛原料藥的質量，同時也為制劑的質量研究提供參考。

附圖說明

圖1為本發明實施例3替格瑞洛分離度溶液的高效液相色譜圖。

圖2為本發明比較例1替格瑞洛分離度溶液的高效液相色譜圖。

具體實施方式

為使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚明了，下面結合具體實施方式，對本發明進一步詳細說明。應該理解，這些描述只是示例性的，而并非要限制本發明的范圍。

實施例1

儀器與色譜條件