[發明專利]一種含黑色素的體外皮膚測試模型及其制備方法

有效

• 申請號: 201510795792.0
• 申請日: 2015-11-18
• 公開（公告）號: CN105353114A
• 公開（公告）日: 2016-02-24
• 發明（設計）人: 程蕊蘋;盧永波;李瀟
• 申請（專利權）人: 陜西博溪生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種含黑色素的體外測試皮膚模型，其特征在于：該皮膚模型包含真皮層和表皮層；所述真皮層包含：6～10層成纖維細胞及成纖維細胞自身分泌的細胞外基質；所述表皮層包含：由黑色素細胞和角質細胞所形成的基底層、棘細胞層、顆粒層和角質層。

2.權利要求1中所述含黑色素的體外測試皮膚模型的制備方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

步驟一、真皮層的構建：

在聚酯纖維膜上加入明膠或基質膠，孵育后30分鐘后，再加入成纖維細胞，進行浸沒培養，置37℃條件下培養24~36小時，促進其形成成纖維細胞膜片，并多次接種產生6~10層成纖維細胞及其分泌的大量細胞外基質的真皮層結構；

步驟二、表皮層的構建：

在步驟一所述的真皮層上加入角質細胞和黑色素細胞的混懸液，進行浸沒式培養，每天換液，形成含黑色素細胞的表皮層結構；

步驟三、體外測試皮膚模型的體外培養：

將含有表皮層和真皮層的體外測試皮膚模型進行氣-液面培養，獲得所述皮膚模型。

3.如權利要求書2所述的含黑色素的體外測試皮膚模型，其特征在于：所述的真皮層的構建采用多次接種技術形成膜片，其接種次數在2～8次之間，優選接種次數為3次，成纖維細胞的接種密度為2×10⁵/cm²。

4.如權利要求書2所述的含黑色素的體外測試皮膚模型，其特征在于：所述的表皮層構建中黑色素細胞和角質細胞的比例在1：5～1：30之間，優選黑色素細胞和角質細胞的比例1:15，接種的細胞密度為2.5×10⁶/cm²。

5.如權利要求1所述的含黑色素的體外測試皮膚模型，其特征在于：該皮膚模型可用于檢測化學品對皮膚的影響，其中所述化學品包括藥品、生物制劑、化妝品原料及成品、保健品原料。

6.如權利要求1所述的含黑色素的體外測試皮膚模型，其特征在于：該皮膚模型可用于檢測藥品、生物制劑、化妝品成品原料、保健品原料的美白祛斑功效。