[發(fā)明專利]一種從辣木子中提取的辣木子小分子肽及其提取方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510745783.0
• 申請(qǐng)日: 2015-11-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105238831A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-01-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘愛(ài)國(guó)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 潘愛(ài)國(guó)
• 主分類號(hào): C12P21/00
• 分類號(hào): C12P21/00;C12P21/06;A23L33/00;A61K38/01;A61P31/00;A61P31/12;A61P35/00
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1.一種從辣木子中提取辣木子小分子肽的方法，其特征在于，依次包括如下步驟：(1)制備發(fā)酵劑；(2)辣木子前處理；(3)初級(jí)微生物發(fā)酵；(4)電解初級(jí)辣木子蛋白；(5)酒精激活胰漿制備；(6)酶解過(guò)程；(7)后處理過(guò)程。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，

步驟(1)制備發(fā)酵劑過(guò)程中，木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、胰蛋白酶三種蛋白酶混合，其中三者的質(zhì)量之比為2∶2∶1，還加入營(yíng)養(yǎng)素，所述的營(yíng)養(yǎng)素為麥芽汁；

步驟(2)辣木子前處理中，采用高壓蒸煮的方法得到辣木子湯；

步驟(3)初級(jí)微生物發(fā)酵中，加入促產(chǎn)劑，所述的促產(chǎn)劑為植酸質(zhì)，發(fā)酵得到初級(jí)微生物發(fā)酵的辣木子蛋白，即初級(jí)辣木子蛋白；

步驟(4)電解初級(jí)辣木子蛋白中，將所述的初級(jí)辣木子蛋白進(jìn)行電解，得到辣木子寡肽湯；

步驟(5)酒精激活胰漿制備中：胰臟做蛋白酶來(lái)源，采用食用酒精一步激活形成胰酶，形成酒精激活胰漿；

步驟(6)酶解過(guò)程中：辣木子寡肽湯、酒精激活胰漿按照一定質(zhì)量比進(jìn)行酶解，分三次加入所述酒精激活胰漿，得到初級(jí)辣木子小分子肽；

步驟(7)后處理過(guò)程中：經(jīng)過(guò)后處理得到辣木子小分子肽。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，具體方法如下：

(1)制備發(fā)酵劑：使用有益菌株的液體培養(yǎng)制備發(fā)酵劑，稱取木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、胰蛋白酶三種蛋白酶，具體為木瓜蛋白酶10重量份，堿性蛋白酶10重量份，胰蛋白酶5重量份，麥芽汁15重量份，混合在一起，并置入到盛裝有培養(yǎng)基的三角瓶中，進(jìn)行復(fù)合培養(yǎng)，所述的培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，在所述三角瓶中進(jìn)行培養(yǎng)的溫度為37℃，在200-250rpm/min下培養(yǎng)18-20h，使菌體或者孢子濃度達(dá)到1×10¹²個(gè)/升(CFU/L)，制得發(fā)酵劑。

(2)辣木子前處理：將新鮮的辣木子破碎，清洗，在蒸煮罐中，采用溫度為130℃以上溫度，壓力0.17-0.18MPa高壓蒸煮300-400min，骨渣排出，湯油導(dǎo)入湯油儲(chǔ)罐中分層分離，得到辣木子湯，

(3)初級(jí)微生物發(fā)酵：將步驟(2)得到的辣木子湯轉(zhuǎn)入至初級(jí)發(fā)酵生產(chǎn)罐中，并加入所述湯重量的0.5-0.8％的促產(chǎn)劑，所述的促產(chǎn)劑為植酸質(zhì)，在35-38℃的低溫下發(fā)酵8-10h，然后升溫至160-200℃繼續(xù)發(fā)酵5-8h，得到初級(jí)微生物發(fā)酵的辣木子蛋白，即初級(jí)辣木子蛋白。

(4)電解初級(jí)辣木子蛋白，將所述的初級(jí)辣木子蛋白進(jìn)行電解，使用常規(guī)的蛋白質(zhì)電解法，電解過(guò)程中，槽電壓為20-50mV，電解時(shí)間為3-5h，取三個(gè)試樣測(cè)試，每個(gè)試樣中的辣木子肽的分子量范圍均不超過(guò)800道爾頓時(shí)，則停止電解，得到辣木子寡肽湯。

(5)酒精激活胰漿制備：酒精激活胰漿制備過(guò)程如下：在胰酶激活器中，放入洗凈的胰臟做蛋白酶來(lái)源，采用食用酒精一步激活形成胰酶，所述食用酒精的加入量是所述胰酶質(zhì)量的2倍，所述食用酒精的體積濃度是45％，所述激活時(shí)間為60-80h，激活溫度為6-8℃，成為酒精激活胰漿。

(6)酶解過(guò)程：將所述辣木子寡肽湯導(dǎo)入水解罐中，然后分三次加入所述酒精激活胰漿，三次加入的所述酒精激活胰漿的質(zhì)量之比為1∶1∶4，第一次是在所述酶解開(kāi)始時(shí)加入，第二次是在所述酶解進(jìn)行1h時(shí)加入，第三次加入是所述酶解進(jìn)行2h時(shí)加入，所述酶解總時(shí)間為7h，所述酒精激活胰漿的加入質(zhì)量是辣木子寡肽湯質(zhì)量的1/9-1/5，在所述酶解過(guò)程中保持水解罐中pH為6.7-7.0；在所述酶解過(guò)程中第一次加入酒精激活胰漿后至第二次加入酒精激活胰漿前的酶解溫度為60℃，第二次加入酒精激活胰漿后的酶解溫度為45℃，得到初級(jí)辣木子小分子肽。

(7)后處理過(guò)程：經(jīng)過(guò)所述酶解過(guò)程，即經(jīng)過(guò)所述酒精激活胰漿在水解罐中的水解，成為水解最終的混合液體，經(jīng)過(guò)過(guò)濾后導(dǎo)入濃縮罐進(jìn)行濃縮，濃縮溫度為50℃，濃縮至少2h，之后降溫，在降溫至30℃時(shí)，測(cè)定波美度不小于30時(shí)，停止?jié)饪s，將濃縮液煮沸滅菌，噴粉干燥，水分含量降至2.5％以下，送入儲(chǔ)罐，密封包裝，得到辣木子小分子肽。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(1)制備發(fā)酵劑過(guò)程中，在所述三角瓶中進(jìn)行培養(yǎng)的溫度為37℃，在200rpm/min下培養(yǎng)20h；步驟(2)辣木子前處理：在蒸煮罐中，采用溫度為150℃，壓力0.17MPa高壓蒸煮400min。