[發(fā)明專利]一種檢測皮膚癌相關(guān)標(biāo)志物的探針組合及其試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510732616.2
• 申請日: 2015-10-30
• 公開（公告）號: CN106636308B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉蘇燕;吳詩揚(yáng);董艷
• 申請（專利權(quán)）人: 益善生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

1.一種探針組合物，其特征在于，所述探針組合物能夠檢測皮膚癌相關(guān)標(biāo)志物，所述標(biāo)志物為hsa-miR-375、hsa-miR-149-3p、hsa-miR-221-3p、hsa-miR-222-3p、hsa-miR-34a-5p、hsa-miR-199a-5p、hsa-miR-137、hsa-miR-182-5p、hsa-miR-125b-5p、hsa-miR-31-5p、hsa-miR-21-5p和hsa-miR-365a-3p；

所述探針組合物包括捕獲探針：

所述捕獲探針的核苷酸序列自5’端至3’端依次為P1序列、間隔臂序列、P2序列；所述P1序列與所述標(biāo)志物特異性結(jié)合；所述間隔臂序列為5個~10個T；所述P1序列選自SEQ ID NO:1~12，所述P2序列選自SEQ ID NO:13~24；

所述捕獲探針選自以下序列：

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:1、5個T、SEQ ID NO:13；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:2、5個T、SEQ ID NO:14；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:3、5個T、SEQ ID NO:15；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:4、5個T、SEQ ID NO:16；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:5、5個T、SEQ ID NO:17；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:6、5個T、SEQ ID NO:18；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:7、5個T、SEQ ID NO:19；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:8、5個T、SEQ ID NO:20；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:9、5個T、SEQ ID NO:21；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:10、5個T、SEQ ID NO:22；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:11、5個T、SEQ ID NO:23；

自5’端至3’端順序連接的SEQ ID NO:12、5個T、SEQ ID NO:24。

2.一種皮膚癌相關(guān)標(biāo)志物檢測試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1所述的捕獲探針和信號放大組合物。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述信號放大組合物為：

一級信號放大探針，在一級信號放大探針的5’端修飾熒光基團(tuán)；

或一級信號放大探針，二級信號放大探針，在二級信號放大探針的3’端修飾熒光基團(tuán)；

或一級信號放大探針、二級信號放大探針，三級信號放大探針，在三級信號放大探針的5’端修飾熒光基團(tuán)；

針對所述捕獲探針中的任一種，所述一級信號放大探針與所述捕獲探針特異性結(jié)合；

針對所述一級信號放大探針中的任一種，所述二級信號放大探針與所述一級信號放大探針特異性結(jié)合；

針對所述二級信號放大探針中的任一種，所述三級信號放大探針與所述二級信號放大探針特異性結(jié)合；

一級信號放大探針自5’端至3’端依次為P4序列、間隔臂序列、P3序列；

二級信號放大探針自5’端至3’端依次為P5序列、間隔臂序列、P6序列；

三級信號放大探針自5’端至3’端依次為P8序列、間隔臂序列、P7序列；

所述P3序列與P2序列特異性結(jié)合；

所述P5序列與P4序列特異性結(jié)合；

所述P6序列與P7序列特異性結(jié)合；

所述間隔臂序列獨(dú)立的為2個~20個T；

所述P8序列為5個T。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述P4序列選自SEQ ID NO:25~36。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述P6序列選自SEQ ID NO:49~60。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光基團(tuán)選自FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED640、Cy5、LC RED705或Alexa Fluor 488，且針對不同捕獲探針的信號放大探針上修飾的熒光基團(tuán)互不相同。