[發(fā)明專利]一種銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510729310.1
• 申請日: 2015-10-30
• 公開（公告）號: CN105259268A
• 公開（公告）日: 2016-01-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳佩穎;閆玉嬌;高崎;顧慧芬
• 申請（專利權(quán)）人: 上海杏靈科技藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所 31219
• 代理人: 許驊;許亦琳

1.一種銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，包括以下步驟：

1)供試品溶液的制備：稱取銀杏酮酯，加入甲醇水溶液，渦旋提取后，過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；

2)參照品溶液的制備：稱取蘆丁對照品，加入甲醇水溶液溶解并定容，即得參照品溶液；

3)測定：采用相同色譜條件的高效液相色譜法分別測定供試品溶液和參照品溶液，將獲得的供試品溶液和參照品溶液的指紋譜圖，與銀杏酮酯的標準指紋譜圖進行比較，根據(jù)相對保留時間，指認出共有特征峰，從而獲得供試品溶液中黃酮類和有機酸類成分的指紋圖譜。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，所述步驟1)中，所述銀杏酮酯加入的重量與所述甲醇水溶液加入的體積之比為1：80-120。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，所述步驟1)中，所述渦旋提取的條件為：提取時間：3-10min；渦旋轉(zhuǎn)速：2500-3000r/min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，步驟1)或步驟2)中，所述甲醇水溶液為10-90％甲醇水溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，所述步驟3)中，所述高效液相色譜法的色譜條件為：色譜柱：C18柱；柱溫：30-40℃；檢測波長：230-280nm；參比波長：400-500nm；流速：0.5-2.0ml/min；進樣量：5-20μl；流動相：乙腈-0.1-0.4％磷酸水溶液，其中，A相為乙腈，B相為0.1-0.4％磷酸水溶液；分析時間：70min；梯度洗脫。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫的具體程序為：0-10min，A相：B相體積比為12：88-13：87；10-13min，A相：B相體積比為13：87-15：85；13-20min，A相：B相體積比為15：85-16：84；20-30min，A相：B相體積比為16：84-21：79；30-40min，A相：B相體積比為21：79-23：77；40-50min，A相：B相體積比為23：77-30：70；50-70min，A相：B相體積比為30：70-75：25。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，所述供試品溶液中黃酮類和有機酸類成分的指紋圖譜中的黃酮類和有機酸類成分，采用電噴霧離子源高分辨串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜法進行測定驗證。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，在銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分的質(zhì)量檢測中的應(yīng)用。

9.一種銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分的質(zhì)量檢測方法，包括采用如權(quán)利要求1-7任一所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，得到銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜，再采用與銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法相同的條件得到銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分的標準指紋圖譜，將得到的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜與銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分的標準指紋圖譜進行相似度比較。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述的銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法，在銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分含量測定中的應(yīng)用。

11.一種銀杏酮酯中黃酮類和/或有機酸類成分含量的測定方法，包括以下步驟：

A)供試品溶液的制備：采用權(quán)利要求1-7任一權(quán)利要求所述銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法的步驟1)制備；

B)對照品溶液的制備：稱取待測的黃酮類和/或有機酸類成分對照品中的一種或多種對照品，加入甲醇水溶液溶解并定容，即得單一對照品溶液或者混合對照品溶液；

C)采用高效液相色譜分別測定步驟A)中的供試品溶液和步驟B)中的對照品溶液，并采用外標法計算供試品溶液中黃酮類和/或有機酸類成分的含量。

12.根據(jù)根據(jù)權(quán)利要求11所述的銀杏酮酯中黃酮類和/或有機酸類成分含量的測定方法，其特征在于，如步驟C)所述高效液相色譜法的色譜條件采用權(quán)利要求1-7任一權(quán)利要求所述銀杏酮酯中黃酮類和有機酸類成分指紋圖譜的檢測方法的色譜條件。