[發明專利]一種調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子及其應用

在審

• 申請號: 201510729014.1
• 申請日: 2015-10-30
• 公開（公告）號: CN105177007A
• 公開（公告）日: 2015-12-23
• 發明（設計）人: 唐克軒;陳俏;沈乾;付雪晴;石璞;孫小芬;顏廷祥
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/84;A01H5/00
• 代理公司: 上海旭誠知識產權代理有限公司 31220
• 代理人: 鄭立

1.一種調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子，其特征在于，所述啟動子的核苷酸序列如SEQIDNo：1所示。

2.一種如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子，其特征在于，所述啟動子上的順式作用元件包括：CGTCA-motif、HSE、MBS、MRE、TC-richrepeats、WUN-motif。

3.一種制備如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、從青蒿基因組中克隆所述啟動子的基因組序列；

步驟二、分析所述啟動子上的順式作用元件，確定所述啟動子類型；

步驟三、將步驟一中獲得的所述啟動子的序列與載體連接；

步驟四、將步驟三中獲得的載體轉化根癌農桿菌；

步驟五、將步驟四中獲得的帶有所述載體的所述根癌農桿菌穩定轉化植物；

步驟六、檢測所述啟動子的轉入，并確定所述啟動子所引導的基因在植株中的表達部位。

4.如權利要求3所述的制備如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子的方法，其特征在于，所述步驟一包括以基因組DNA為模板，采用兩輪巢式PCR方法擴增所述啟動子序列。

5.如權利要求3所述的制備如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子的方法，其特征在于，所述步驟三中的載體為pCAMBIA1391z，利用引物對1391z-proTPS7-F和1391z-proTPS7-R，通過PCR在獲得的所述啟動子序列中引入酶切位點PstI和NcoI，從而連接到載體pCAMBIA1391z上，其中引物序列如下所示：

1391z-proTPS7-F：5’-AACTGCAGAAGAGAAAGCTACATACAATGGGAA-3’；

1391z-proTPS7-R：5’-CATGCCATGGGGAGAAAGATCGGTTATGC-3’。

6.如權利要求3所述的制備如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子的方法，其特征在于，所述步驟五包括：

1)外植體的預培養；

2)農桿菌與外植體的共培養；

3)抗性再生植株的篩選。

7.一種載體，其特征在于，所述載體連接有如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子。

8.一種表達盒，其特征在于，所述表達盒包括如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子。

9.一種如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子用于利用植物腺毛組織表達和在植物生產代謝產物的基因工程育種中的應用。

10.一種如權利要求1所述的調控基因在非分泌型腺毛中表達的啟動子在非分泌型腺毛的發生和發育以及其中的次級代謝產物的代謝調控研究中的應用。