[發明專利]固定脂肪酶的磁性氧化石墨復合物載體的制備方法及其固定脂肪酶的方法

在審

• 申請號: 201510726461.1
• 申請日: 2015-10-29
• 公開（公告）號: CN105154429A
• 公開（公告）日: 2015-12-16
• 發明（設計）人: 荊濤;邵詠博;田景芝;鄭永杰;李艷云;李文斌
• 申請（專利權）人: 齊齊哈爾大學
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務所(普通合伙) 23210
• 代理人: 王艷萍

1.固定脂肪酶的磁性氧化石墨復合物載體的制備方法，其特征在于該方法按以下步驟進行：

一、采用溶劑熱法制備Fe₃O₄納米粒子；

二、采用stober法在Fe₃O₄納米粒子外面包裹一層介孔硅，得到具有核殼結構的磁性介孔硅，記為Fe₃O₄MCM-41；

三、采用hummers法制備氧化石墨；

四、按Fe₃O₄MCM-41的質量與氧化石墨的質量比為1：(100～150)的比例稱取步驟二制備的Fe₃O₄MCM-41、量取步驟三制備的氧化石墨分散液，先把Fe₃O₄MCM-41分散到無水乙醇中，再加入氧化石墨分散液，混合液攪拌1～2h，然后滴加3-氯丙基三乙氧基硅烷，升溫至120～130℃，攪拌回流10～12h，最后用無水乙醇洗滌干凈，冷凍干燥，得到固定脂肪酶的磁性氧化石墨復合物載體。

2.根據權利要求1所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨復合物載體的制備方法，其特征在于Fe₃O₄納米粒子的制備方法如下：按六水合三氯化鐵與硝酸鈉的質量比為1：(2～3)將六水合三氯化鐵與硝酸鈉溶解在乙二醇中，然后轉移到反應釜中，升溫至190～200℃并保持19～20h，然后降至常溫，將得到的沉淀物分別用無水乙醇和丙酮洗滌干凈，最后用磁鐵收集，將收集的黑色產物在50～60℃條件下真空干燥，得到Fe₃O₄納米粒子。

3.根據權利要求2所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨復合物載體的制備方法，其特征在于六水合三氯化鐵與硝酸鈉的質量之和與乙二醇的體積的比為1g：(9～10)ml。

4.根據權利要求1或2所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨復合物載體的制備方法，其特征在于步驟二中Fe₃O₄MCM-41的制備方法如下：稱取Fe₃O₄納米粒子、十六烷基三甲基溴化銨、正硅酸乙酯和質量濃度為25％的氨水；將Fe₃O₄納米粒子加入到無水乙醇中超聲分散，得到Fe₃O₄分散液；將十六烷基三甲基溴化銨加入到蒸餾水中，攪拌溶解均勻，得到模板劑溶液；將Fe₃O₄分散液加入到模板劑溶液中，混合均勻后，加入稱取的正硅酸乙酯，再混合均勻后，加入稱取的質量濃度為25％的氨水，在室溫下攪拌6～10h，分離出固相物，用無水乙醇和丙酮洗滌干凈，再進行用磁鐵收集，將收集的產物于50～60℃條件下真空干燥10～12h，得到復合Fe₃O₄納米粒子，將該復合Fe₃O₄納米粒子分散在酸化乙醇中，在80～85℃下索氏提取10～12h，干燥后，得到Fe₃O₄MCM-41。

5.根據權利要求4所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨復合物載體的制備方法，其特征在于Fe₃O₄納米粒子與十六烷基三甲基溴化銨的質量比為1：(1～1.2)；Fe₃O₄納米粒子的質量與正硅酸乙酯的體積的比為1g：(5～8)ml；正硅酸乙酯與質量濃度為25％的氨水的體積比為1：(5～6)。

6.根據權利要求4所述的固定脂肪酶的磁性氧化石墨復合物載體的制備方法，其特征在于酸化乙醇是將2ml質量百分濃度為35～37％的鹽酸加入到50ml無水乙醇中，混合均勻后得到的。