[發明專利]一種疫苗佐劑及利用其制成的佐劑疫苗

在審

• 申請號: 201510720809.6
• 申請日: 2015-10-30
• 公開（公告）號: CN105288615A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: 趙軍;肖建設;潘慧青;張炎達;楊榮平;史金慧;林賀桂;鄧翠芬;趙清國;李曉航;趙齊
• 申請（專利權）人: 福建貝迪藥業有限公司;鄭州貝迪生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/02;A61K39/135;A61K48/00;A61P31/04;A61P31/14
• 代理公司: 鄭州豫開專利代理事務所(普通合伙) 41131
• 代理人: 張智偉

技術領域

本發明屬于醫藥與醫學工程技術領域，特別涉及一種疫苗佐劑及利用其制成的佐劑疫苗。

背景技術

現代養殖業已成為全球一大產業，且規模呈不斷擴展態勢。疫苗的應用對于養殖業控制動物疾病的流行起到了非常重要的作用，除傳統的減毒疫苗外，新型疫苗不斷得到開發利用，如多肽疫苗、DNA疫苗和滅活蛋白疫苗等。這些疫苗雖然比傳統疫苗安全，但其和傳統疫苗一樣都存在免疫原性較弱，致使誘導機體產生的免疫應答不夠強，因此，有必要配合安全高效的佐劑來增強其免疫原性或增強宿主對抗原的保護性應答。

目前常用的免疫佐劑大致有幾十種，如常用的有鋁鹽及礦物質佐劑（氫氧化鋁、氯化鈣硫酸鋅）、油佐劑（弗式佐劑、白油）、左旋咪哇、蜂膠、轉移因子和干擾素等。然而，油乳類和鋁鹽礦物類化學佐劑副作用較大，皮下注射時常有持續性肉芽腫、不能很好地吸收、也不能有效刺激保護性T細胞免疫。這些反應較多與佐劑引起對特定抗原的免疫應答、產生炎癥反應的細胞因子,從而導致炎癥反應的產生有關。此外，這一類佐劑在機體內降解吸收慢、殘留時間長、影響畜禽的外觀及食用安全。因此，開發研制新型免疫佐劑以增強疫苗免疫效力并減少疫苗的毒副作用是未來的發展趨勢，理想的佐劑應該有以下特征：①作用于弱免疫性抗原，促進體液或細胞免疫應答，不引起有害的副作用；②能以不同途徑免疫，也能用于不同抗原；③在免疫抑制個體中發揮作用；④應用于食用動物不應有毒素殘留；⑤能有效影響免疫反應質量；⑥穩定且易生產。

中藥是我國的國粹，具有天然、無毒、無副作用的突出特點，一些補中益氣中藥可提高免疫系統組織細胞的活性、提高機體免疫力，可研究成為新的疫苗佐劑。如鮑國連等人將中藥方劑應用到對鴨疫里氏桿菌疫苗的免疫佐劑實驗中，證明其可提高受免疫鴨的抗體水平，且對鴨生長沒有任何負面影響。另外還有專利ZL201210116643.3、ZL200710027063.6和ZL200810059353.3等分別對中藥巴戟天、人參等8種中藥、木鱉子的提取物作為主要有效成分用于免疫佐劑，均取得了理想的效果。

中藥太子參為石竹科孩兒屬植物孩兒參的干燥根，別名孩兒參、童參、雙批七、四葉參或米參，為珍貴中藥，富含多種人體必需氨基酸、活性多糖和皂苷類化合物等，具有益氣生津、補肺健脾的功效，特點為益氣但不提升，生津但不助濕，扶正但不戀邪，補虛又不峻猛。主治心悸自汗，疲倦乏力，脾虛食少，氣陰不足，自汗口渴，肺燥干咳等癥。

發明內容

本發明的目的在于提供一種疫苗佐劑及利用其制成的佐劑疫苗。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案如下：

一種疫苗佐劑，其有效成分為太子參為主料的中藥提取物，所述太子參為主料的中藥提取物按下述步驟制備而得：

（i）、干燥和粉碎：將太子參、淫羊藿、黃芪和靈芝分別進行干燥后，以質量比計，按太子參︰淫羊藿︰黃芪︰靈芝=5-7︰0.5-1.5︰1.5-2.5︰0.5-1.5的固定比例混合并粉碎；

（ii）、超聲預處理：將步驟（i）獲得的中藥粉按固液比g/ml=1:10-1:30加入乙醇進行超聲；

（iii）、低溫超臨界CO₂萃取：將步驟（ii）超聲后獲得的中藥乙醇分散液進行烘干后，再在夾帶劑存在的條件下進行低溫超臨界CO₂萃取，萃取操作參數為：夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為1-3%，萃取溫度35-50℃，萃取壓力10-25MPa，CO₂流量2-4L/h，萃取時間0.5-2h；所述夾帶劑為乙醇、乙二醇、丙酮和乙酸乙酯中的一種或多種；待萃取結束后，減壓回收夾帶劑，即得太子參為主料的中藥提取物。

較好地，步驟（i）中：干燥至水分的質量百分含量不高于10%；粉碎目數為65-80目。步驟（ii）中：乙醇為體積純度為85%以上的乙醇；超聲時的參數為：超聲功率50-200W，超聲頻率20-40kHz，超聲時間30-50min。步驟（iii）中：烘干時的溫度為60-80℃，夾帶劑的體積純度為80-100%；若夾帶劑為多種時，等體積比混合使用。

利用所述疫苗佐劑制備而成的佐劑疫苗：將疫苗佐劑先與無菌去離子水按體積比例1：5-10混勻，獲得疫苗佐劑稀釋液；再將疫苗佐劑稀釋液直接和疫苗混合，即制得佐劑疫苗；其中所述疫苗佐劑在制備得到的佐劑疫苗中所占的體積比為2.5-8%。