[發明專利]一種乙肝病毒藥物的微膠囊載體的制備方法

在審

• 申請號: 201510720021.5
• 申請日: 2015-10-30
• 公開（公告）號: CN105287432A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: 胡智文;蘇孝鵬;王秉
• 申請（專利權）人: 浙江理工大學
• 主分類號: A61K9/50
• 分類號: A61K9/50;A61K45/00;A61K47/32;A61P1/16;A61P31/20
• 代理公司: 杭州之江專利事務所(普通合伙) 33216
• 代理人: 朱楓

技術領域

本發明屬于生物制藥領域，尤其涉及一種形態可控的乙肝病毒藥物的微膠囊載體制備方法。

背景技術

當前，針對治療乙肝病毒感染的藥物主要分為兩類：抗病毒類藥物（類核苷類）和免疫調節類藥物（干擾素）。盡管沒有藥物可以清除感染，但是，這些藥物可以阻止病毒的復制，進而使其對肝臟的傷害降到最低。但是，這些藥物具有較短的半衰期，因此需要每天進藥，從而容易產生抗藥性和其他毒副作用。

綜上所述，在生理條件下對其藥物組分進行保護并且增加藥物在細胞內的駐留時間可以極大地提高治療的效果。為了實現這個目的，這些藥物被包埋在可降解聚合微膠囊中，延長藥物的釋放過程，提高藥物的效率降低副作用。

然而，眾所周知，膠囊顆粒的大小、形狀等對微膠囊的細胞吞噬、釋放等影響是巨大的，如果能夠控制微膠囊的形態大小，對未來微膠囊在生物學方面的研究起關鍵作用。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供一種乙肝病毒藥物的微膠囊載體的制備方法，以實現微膠囊形態大小可控，且操作簡單方便、環境影響小的目的。

為此采用如下的技術方案，一種乙肝病毒藥物的微膠囊載體的制備方法，其特征在于采取以下步驟：

A）取聚丙烯酸、支化聚乙烯亞胺、聚乙烯吡咯烷酮用80%的乙醇溶液配制成5mg/mL的混合溶液；

B）將1~3mL重量百分比為2.6%的聚苯乙烯和7~15mL濃度為1mg/mL的聚醋酸乙烯酯混合、鋪勻、干燥得到厚度約為75um的薄膜；然后置于120℃油浴拉伸變形，拉伸比根據預定的微膠囊形狀確定，然后室溫冷卻；之后用異丙醇洗滌去油后切成1~4mm²的微粒，溶解于體積比為70：30的水與異丙醇的混合溶液中；

C）將經過步驟B）處理的混合溶液分別置于1000、10000、30000r轉速下離心15min，分別可以得到3um、500nm、200nm的聚苯乙烯顆粒；重復用體積比為70：30的水/異丙醇混合溶液溶解所述聚苯乙烯顆粒，并于1000、10000、30000r轉速下離心15min，重復此溶解、離心步驟4次后，將所得的3um、500nm、200nm聚苯乙烯顆粒分散于80%的乙醇溶液中；

D）將異硫氰酸熒光劑溶解于二甲基亞砜中配制成0.1M的溶液，聚丙烯酸溶解于80%的二甲基亞砜中配制成0.1M的溶液；然后在制得的1~5mL聚丙烯酸溶液中加入4~20mg的碳二亞胺，10min之后加入3~9mg羥基琥珀酰亞胺，過5min之后加入上述配制的異硫氰酸熒光劑溶液20~40ul，并置于80%乙醇溶液中透析24h，制備得到聚丙烯酸-異硫氰酸熒光劑溶液，所述過程均需要避光處理；

E)取C）中100mL重量百分比2.6%的聚苯乙烯溶液，離心，然后重新分散于4~10ml的80%乙醇中；

F）在步驟E)中制得的溶液中加入1~4mL支化聚乙烯亞胺溶液，然后超聲10min，離心10min，在1000、5000、10000r轉速下可制備3um、500nm、200nm的顆粒，去除上清液，加入80%的乙醇再次分散和離心；

G）將F）中得到的聚苯乙烯顆粒再次分散于4~10mL80%的乙醇溶液中，并加入1~4mL通過步驟D)制得的聚丙烯酸-異硫氰酸熒光劑溶液，超聲10min，離心10min，在1000、5000、10000r轉速下可制備3um、500nm、200nm的顆粒，去除上清液，加入80%的乙醇再次分散和離心；

H）將G）中得到的聚苯乙烯顆粒再次分散于4~10mL80%的乙醇溶液中，加入1~4mL通過步驟A）制得的溶液，超聲10min，離心10min，在1000、5000、10000r轉速下制備3um、500nm、200nm的顆粒，去除上清液，加入80%的乙醇再次分散和離心；制備得到聚乙烯亞胺/（聚丙烯酸-異硫氰酸熒光劑/聚乙烯吡咯烷酮）顆粒，即PEI/（PAA-F/PVPON）顆粒；

I）將H）中得到的PEI/（PAA-F/PVPON）顆粒溶解于4~8mL的四氫呋喃中，2min之后再離心25min，于1000、5000、8000r轉速分別制備3um、500nm、200nm的微膠囊，除去上清液，用200~500ul的四氫呋喃洗滌2次，然后將得到的微膠囊分散于500~800ul水中。

本發明有益的效果是：采用聚苯乙烯作為微膠囊模板，具有方便、容易去除、對環境要求低的要求，并且能夠有效地控制微膠囊形態結構和尺寸大小。

具體實施方式

實施例1采取以下步驟：