[發(fā)明專(zhuān)利]一種禽類(lèi)蛋殼中有機(jī)基質(zhì)的提取方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510710364.3
• 申請(qǐng)日: 2015-10-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105396861A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-03-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉長(zhǎng)國(guó)
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 浙江農(nóng)林大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): B09B3/00
• 分類(lèi)號(hào): B09B3/00;B09B5/00
• 代理公司: 北京中政聯(lián)科專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 11489
• 代理人: 吳建鋒

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于有機(jī)基質(zhì)的提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種禽類(lèi)蛋殼中有機(jī)基質(zhì)的提取方法。

背景技術(shù)

禽類(lèi)蛋殼屬于生物礦化物質(zhì)，由有機(jī)物質(zhì)和大量礦物質(zhì)共同構(gòu)成，要獲取蛋殼中的有機(jī)基質(zhì)首先必須充分去除與之緊密結(jié)合的礦物質(zhì)。目前，去除禽類(lèi)蛋殼中的礦物質(zhì)，提取有機(jī)基質(zhì)主要有兩種方法：一種是采用0.6MEDTA(相當(dāng)于質(zhì)量濃度22.5％)去除礦物質(zhì)；另一種是采用一次性加入體積濃度50％乙酸或低濃度鹽酸去除礦物質(zhì)。采用0.6MEDTA去除礦物質(zhì)，會(huì)使得提取出來(lái)的蛋殼有機(jī)基質(zhì)結(jié)合EDTA，難以除去，影響后續(xù)的深加工。而采用一次性加入高濃度乙酸或者低濃度鹽酸去除礦物質(zhì)的過(guò)程中，有機(jī)基質(zhì)長(zhǎng)時(shí)間處于極低pH環(huán)境(即強(qiáng)酸環(huán)境)中，會(huì)使部分有機(jī)基質(zhì)的成分受到破壞，影響提取得到的有機(jī)基質(zhì)的性能和品質(zhì)。

此外，禽類(lèi)蛋殼脫礦后，需要對(duì)乙酸和溶解的礦物鹽進(jìn)行透析去除，目前缺乏程序性的透析工藝。

再者，現(xiàn)有的禽類(lèi)蛋殼有機(jī)基質(zhì)提取技術(shù)最終獲得的僅僅是一組基質(zhì)，其中包含多種成分，不利于后續(xù)的精細(xì)開(kāi)發(fā)應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，實(shí)有必要提供一種禽類(lèi)蛋殼中有機(jī)基質(zhì)的提取方法，采用低濃度的乙酸進(jìn)行脫礦，低濃度乙酸的酸性較弱，有利于保護(hù)禽類(lèi)蛋殼中的有機(jī)基質(zhì)，使其不被破壞。同時(shí)，乙酸分階段逐步加入，可以進(jìn)一步保護(hù)有機(jī)基質(zhì)不被破壞，還可以更有效地實(shí)現(xiàn)脫礦效果。且乙酸極易溶于水，有利于后續(xù)過(guò)程中乙酸的去除。

本發(fā)明提供了一種禽類(lèi)蛋殼中有機(jī)基質(zhì)的提取方法，所述方法包括：

采用EDTA(乙二胺四乙酸，EthyleneDiamineTetraaceticAcid)去除蛋殼外表面有機(jī)物質(zhì)及內(nèi)表面殼膜，并粉碎成末；

往粉碎后的蛋殼粉末中加入體積濃度2-23％的乙酸水溶液，對(duì)所述蛋殼進(jìn)行脫礦處理；每100重量份蛋殼粉末，需要1500-3000重量份、體積濃度為2-23％的乙酸水溶液；

在16℃以下，將脫礦處理后的溶液經(jīng)離心分離出第一上清液和第一沉淀物，所述第一沉淀物即為酸不溶性有機(jī)基質(zhì)。

本發(fā)明所述的禽類(lèi)蛋殼包括但不限于雞、鴨、鵝、火雞、鴕鳥(niǎo)、孔雀、鵪鶉、鳥(niǎo)類(lèi)等蛋殼。

優(yōu)選地，所述采用EDTA去除蛋殼外表面有機(jī)物質(zhì)及內(nèi)表面殼膜，并粉碎成末具體包括：

采用重量濃度2-10％EDTA浸泡所述蛋殼10-40min后，洗去所述蛋殼外表面的有機(jī)物質(zhì)和內(nèi)表面的殼膜，晾干/烘干后，將蛋殼粉碎成末。

優(yōu)選地，所述往粉碎后的蛋殼粉末中加入體積濃度2-23％的乙酸水溶液，對(duì)所述蛋殼進(jìn)行脫礦處理具體包括：

配置體積濃度為2-23％的乙酸水溶液；

往100重量份的蛋殼粉末中，加入500-1000重量份的配置好的乙酸水溶液，于20℃以下攪拌脫礦4-12小時(shí)；按照相同處理先后共3次加入配置好的乙酸水溶液，以使礦物質(zhì)充分溶解。

優(yōu)選地，所述脫礦處理的攪拌速度為500-1200轉(zhuǎn)/分鐘(rmp)。

優(yōu)選地，所述在16℃以下，將脫礦處理后的溶液經(jīng)離心分離出第一上清液和第一沉淀物，具體包括：

在16℃以下，以20000-40000xg離心力離心10-30min，分離出第一上清液和第一沉淀物，將第一沉淀物用ddH₂O(重蒸水)洗滌，以20000-40000xg離心力離心兩次，將第一沉淀物凍干得酸不溶性有機(jī)基質(zhì)。

優(yōu)選地，所述方法還包括：

將所述第一上清液用透析袋進(jìn)行透析脫鹽脫酸；

在16℃以下，將透析脫鹽脫酸后的溶液進(jìn)行離心分離出第二上清液和第二沉淀物，所述第二沉淀物即為水不溶性有機(jī)基質(zhì)。

優(yōu)選地，所述將所述第一上清液用透析袋進(jìn)行透析脫鹽脫酸，具體包括：用去離子水對(duì)所述第一上清液進(jìn)行透析脫鹽脫酸，所述透析袋分子截留量為2-15kDa，透析時(shí)間為4-12小時(shí)，所述第一上清液與所述去離子水的體積比為1:(20-30)；用去離子水重復(fù)透析脫鹽脫酸三次后，用ddH₂O(重蒸水)透析脫鹽脫酸4-20小時(shí)。

優(yōu)選地，所述在16℃以下，將透析脫鹽脫酸后的溶液進(jìn)行離心分離出第二上清液和第二沉淀物，所述第二沉淀物即為水不溶性有機(jī)基質(zhì)，具體包括：

在16℃以下，以2000-6000xg離心力離心10-60min，將透析脫鹽脫酸后的溶液離心分離出第二上清液和第二沉淀物，將第二沉淀物洗滌1次以上，以2000-6000xg離心力離心10-60min后，將第二沉淀物凍干，獲得水不溶性有機(jī)基質(zhì)。

優(yōu)選地，所述方法還包括：