[發明專利]一種禽類蛋殼中有機基質的提取方法

在審

• 申請號: 201510710364.3
• 申請日: 2015-10-28
• 公開（公告）號: CN105396861A
• 公開（公告）日: 2016-03-16
• 發明（設計）人: 劉長國
• 申請（專利權）人: 浙江農林大學
• 主分類號: B09B3/00
• 分類號: B09B3/00;B09B5/00
• 代理公司: 北京中政聯科專利代理事務所(普通合伙) 11489
• 代理人: 吳建鋒

1.一種禽類蛋殼中有機基質的提取方法，其特征在于，所述方法包括：

采用EDTA去除蛋殼外表面有機物質及內表面殼膜，并粉碎成末；

往粉碎后的蛋殼粉末中加入體積濃度2-23％的乙酸水溶液，對所述蛋殼進行脫礦處理；

在16℃以下，將脫礦處理后的溶液經離心分離出第一上清液和第一沉淀物，所述第一沉淀物即為酸不溶性有機基質。

2.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述采用EDTA去除蛋殼外表面有機物質及內表面殼膜，并粉碎成末具體包括：

采用重量濃度為2-10％EDTA浸泡所述蛋殼10-40min后，洗去所述蛋殼外表面的有機物質和內表面的殼膜，晾干/烘干后，將蛋殼粉碎成末。

3.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述往粉碎后的蛋殼粉末中加入體積濃度2-23％的乙酸水溶液，對所述蛋殼進行脫礦處理具體包括：

配置體積濃度為2-23％的乙酸水溶液；

往100重量份的蛋殼粉末中，加入500-1000重量份的配置好的乙酸水溶液，于20℃以下攪拌脫礦4-12小時；按照相同處理先后共3次加入配置好的乙酸水溶液，以使礦物質充分溶解。

4.根據權利要求3所述的提取方法，其特征在于，所述脫礦處理的攪拌速度為500-1200轉/分鐘。

5.根據權利要求1-4任一項所述的提取方法，其特征在于，所述在16℃以下，將脫礦處理后的溶液經離心分離出第一上清液和第一沉淀物，具體包括：

在16℃以下，以20000-40000xg離心力離心10-30min，分離出第一上清液和第一沉淀物，將第一沉淀物用ddH₂O洗滌，以20000-40000xg離心力離心兩次，將第一沉淀物凍干得酸不溶性有機基質。

6.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述方法還包括：

將所述第一上清液用透析袋進行透析脫鹽脫酸；

在16℃以下，將透析脫鹽脫酸后的溶液進行離心分離出第二上清液和第二沉淀物，所述第二沉淀物即為水不溶性有機基質。

7.根據權利要求6所述的提取方法，其特征在于，所述將所述第一上清液用透析袋進行透析脫鹽脫酸，具體包括：用去離子水對所述第一上清液進行透析脫鹽脫酸，所述透析袋分子截留量為2-15kDa，透析時間為4-12小時，所述第一上清液與所述去離子水的體積比為1:(20-30)；用去離子水重復透析脫鹽脫酸三次后，用ddH₂O透析脫鹽脫酸4-20小時。

8.根據權利要求6或7所述的提取方法，其特征在于，所述在16℃以下，將透析脫鹽脫酸后的溶液進行離心分離出第二上清液和第二沉淀物，所述第二沉淀物即為水不溶性有機基質，具體包括：

在16℃以下，以2000-6000xg離心力離心10-60min，將透析脫鹽脫酸后的溶液離心分離出第二上清液和第二沉淀物，將第二沉淀物洗滌1次以上，以2000-6000xg離心力離心10-60min后，將第二沉淀物凍干，獲得水不溶性有機基質。

9.根據權利要求6所述的提取方法，其特征在于，所述方法還包括：

將第二上清液用超濾離心管進行濃縮，獲得水和酸兼溶性有機基質。

10.根據權利要求9所述的提取方法，其特征在于，所述將第二上清液用超濾離心管進行濃縮，獲得水和酸兼溶性有機基質，具體包括：將所述第二上清液于超濾離心管中，所述超濾離心管分子截留量為2-15kDa，用2000-6000xg離心力離心5-60min，將所述第二上清液濃縮后凍干，得水和酸兼溶性有機基質。