[發明專利]一種分泌型Sema4C蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201510699053.1
• 申請日: 2015-10-21
• 公開（公告）號: CN105259348A
• 公開（公告）日: 2016-01-20
• 發明（設計）人: 馬丁;高慶蕾;魏軍成;楊潔;喬龍
• 申請（專利權）人: 珠海雅馬生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立

1.一種分泌型Sema4C蛋白，其特征在于，所述分泌型Sema4C蛋白為膜型Sema4C蛋白的胞外段，包括SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。

2.根據權利要求1所述一種分泌型Sema4C蛋白，其特征在于，在SEQIDNO.1所示的氨基酸序列中插入一段標簽序列。

3.根據權利要求1或2所述一種分泌型Sema4C蛋白，其特征在于，所述分泌型Sema4C蛋白以分泌形式存在且能夠在人血清中被檢測到。

4.一種編碼權利要求1或2所述的分泌型Sema4C蛋白的核苷酸序列。

5.一種權利要求1或2所述的分泌型Sema4C蛋白作為腫瘤標志物的應用。

6.一種權利要求1或2所述的分泌型Sema4C蛋白作為腫瘤標志物在乳腺癌術前檢測及術后監測中的應用。

7.一種以分泌型Sema4C蛋白為腫瘤標志物的試劑盒，其特征在于，包括以下組成：包被到酶標板上的綿羊抗人Sema4C多克隆抗體、檢測抗體為小鼠抗人Sema4C單克隆抗體、鏈霉親和素-辣根過氧化物酶標記的驢抗小鼠IgG多克隆抗體、標準品，所述標準品為Sema4C人重組蛋白，所述Sema4C人重組蛋白包括SEQIDNO.2所示的氨基酸序列。

8.根據權利要求7所述一種以分泌型Sema4C蛋白為腫瘤標志物的試劑盒，其特征在于，

1)所述包被到酶標板上的綿羊抗人Sema4C多克隆抗體，母液濃度為0.2mg/mL，稀釋50倍后的工作液的濃度為4ug/mL；

2)檢測抗體為小鼠抗人Sema4C單克隆抗體，母液的濃度為0.2mg/mL，利用生物素標記后，使用時，將生物素標記的小鼠抗人Sema4C單克隆抗體稀釋500倍得到的工作液濃度為0.4ug/mL；

3)鏈霉親和素-辣根過氧化物酶標記的驢抗小鼠IgG多克隆抗體，母液的濃度為0.5mg/mL；

4)標準品，母液的濃度為100ng/uL。

9.根據權利要求7或8所述一種含有分泌型Sema4C蛋白的試劑盒，其特征在于，還包括包被緩沖液、洗滌液、封閉液、加樣緩沖液、顯色液、反應終止液。

10.根據權利要求9所述一種以分泌型Sema4C蛋白為腫瘤標志物的試劑盒，其特征在于，

1)所述包被緩沖液為磷酸鹽緩沖液，其成分為140mMNaCl、2.7mMKCl、10mMNa₂HPO₄、1.8mMKH₂PO₄，pH值為7.4；

2)所述洗滌液為添加了體積分數為0.05％的Tween-20的包被緩沖液；

3)所述封閉液為含有體積分數為1％的牛血清白蛋白的包被緩沖液；

4)所述加樣緩沖液的成分為50mMTris-HCl、0.5MKCl、體積分數為1％的牛血清白蛋白、體積分數為0.05％的Tween-20，pH值為8.4；

5)所述反應終止液的成分為2MH₂SO₄。