[發明專利]一種藥用野生稻基因OobZIP2及其表達載體和構建方法

有效

• 申請號: 201510697458.1
• 申請日: 2015-10-21
• 公開（公告）號: CN105177021B
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發明（設計）人: 陳志雄;戴雙鳳;劉向東;譚碧蘭;謝海媚;夏昌選
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/66;C12N15/82;C07K14/415;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙) 44288
• 代理人: 陳軒

1.一種藥用野生稻基因OobZIP2，其特征在于，該基因編碼的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示。

2.如權利要求1所述的藥用野生稻基因OobZIP2的表達載體的構建方法，包括以下步驟：

a）PCR擴增：以該基因的重組質粒為模板，采用如SEQ ID No.4的上游引物以及如SEQID No.5所示的下游引物，進行PCR擴增，電泳切膠回收；

b）雙酶切：用Sac I和Not I對步驟a）得到的切膠回收產物進行雙酶切，切膠回收后得到酶切基因片段；

c）連接：用Sac I和Not I對質粒pet32a(+)進行雙酶切，切膠回收后，與步驟b）得到的酶切基因片段進行連接，得到重組原核表達載體pet32a-OobZIP2。

3.如權利要求2所述的表達載體。

4.如權利要求1所述的藥用野生稻基因OobZIP2的表達載體的構建方法，所述表達載體為超表達載體，包括以下步驟：

a）PCR擴增：以該基因的重組質粒為模板，以如SEQ ID No.6所示的上游引物和如SEQID No.7所示的下游引物，進行PCR擴增，電泳切膠回收；

b）雙酶切：用Sma I和Xba I對步驟a）得到的切膠回收產物進行雙酶切，切膠回收后得到酶切基因片段；

c）連接：用Sma I和Xba I對質粒pCAMBIA1301進行雙酶切，切膠回收后，與步驟b）得到的酶切基因片段進行連接，得到表達載體。

5.如權利要求4所述 的表達載體。

6.一種氨基酸序列，其特征在于，所述氨基酸由權利要求1所述的藥用野生稻基因OobZIP2編碼，所述氨基酸序列如SEQ ID No.16所示。

7.如權利要求1所述的藥用野生稻基因OobZIP2在增強水稻抗逆性中的應用。