[發明專利]一種酶法水解蝸牛黏液制備生物活性肽的方法

在審

• 申請號: 201510678834.2
• 申請日: 2015-10-19
• 公開（公告）號: CN105132510A
• 公開（公告）日: 2015-12-09
• 發明（設計）人: 劉莉;史吉平;姜標
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海高等研究院
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 上海碩力知識產權代理事務所 31251
• 代理人: 劉紅梅

技術領域

本發明涉及蛋白質水解技術領域，具體涉及一種酶法水解蝸牛黏液制備生物活性肽的方法。

背景技術

蝸牛黏液是蝸牛的足腺分泌的粘滑液體，幫助蝸牛在爬行過程中保護腹足肌肉與地面直接摩擦時不受到損傷；也可以讓蝸牛在靜止時吸附在巖石表面，形成暫時的封閉結構。蝸牛黏液密度較大，不易蒸散，進而減緩體內水分的散失，所以蝸牛黏液具有降低水分散失、濕潤皮膚的作用。蝸牛黏液中含水量為95％-99％，蛋白質含量為5.0-5.1mg/g，糖類含量0.3-0.6mg/g，是蝸牛黏液中最主要的活性物質。此外，還含有大量活性物質如糖蛋白、尿囊素、甘醇酸、骨膠原、軟骨素、維生素、小分子抗氧化類物質等制作化妝品必不可少的材料。例如蛋白質可以增加皮膚營養，使肌膚更加細膩和光滑，還具有較強的抗氧化作用：其中的膠原蛋白，是皮膚重要結締組織成分，與彈力蛋白共同架構完整皮膚，具有保持水分的功效；彈力蛋白可保持皮膚組織，當年齡增長時，皮膚失去彈性產生皺紋，適當補充彈力蛋白可防治皺紋提早出現，并減少紫外線對皮膚的傷害。黏液中的尿囊素可有效修補傷痕，刺激細胞再生，是皮膚柔軟劑和抗氧化劑。另外蝸牛黏液也是一種天然抗生素，能夠殺死皮膚上的某些細菌，消除皮膚斑點和痤瘡。除了被應用于化妝品外，蝸牛黏液在治愈燒傷皮膚和處理大的疤痕皮膚等方面具有顯著的功效。

然而，蝸牛黏液中的蛋白質由于分子量大，結構復雜，粘度大，人體吸收率并不高。因此可將黏液中的蛋白質水解為分子量較小的生物活性肽，加強皮膚對蝸牛黏液中蛋白質的吸收，擴大蝸牛黏液的應用范圍。

生物活性肽是指對生物機體的生命活動有益或具有生理功能的肽類化合物。與蛋白質相比，活性肽具有良好的理化性能，如良好的溶解性和水合性、粘度低、生物利用率高，比氨基酸更易吸收，具有調節人體生理機能的功效，是原蛋白質及其組成氨基酸所不具備的。因此被廣泛應用于食品、保健品和化妝品中。

近年來，世界各國已經從各種乳蛋白、大豆蛋白、玉米蛋白、魚貝類蛋白、膠原蛋白等食物蛋白中提取和分離得到多種生物活性肽。其中一些已作為保健食品和藥物實現了工業化生產，并取得巨大的經濟效益?；钚噪念愂称?、保健品和化妝品在日本、美國、歐洲已上市，其中日本在活性肽生產方面走在世界前列。而我國對活性肽的研究起步較晚，產品并不多見。因此，充分利用我國豐富的蛋白質資源，開發具有良好生物活性的肽類產品，具有非常廣泛的市場和應用前景。

目前對蝸牛產品的應用開發多集中在食品和化妝品領域，研究比較多的是多糖、蝸牛酶、分泌物提取等方面，但未見對蝸牛黏液中的蛋白質水解方面的研究。由蝸牛黏液中的蛋白質水解制備的生物活性肽，與植物來源的產品相比，其氨基酸組成和比例與人體氨基酸更為相似。在生產工藝方面，傳統的方法多采用酸法水解動植物蛋白，生產工藝較難控制，造成氨基酸一定程度的破壞；而且酸和高溫條件往往導致水解液中含有致癌物質，尤其是氯丙醇含量超標，大大限制了產品的使用。本發明采用酶法水解蝸牛黏液制備生物活性肽，具有反應條件溫和、原料有效成分保存完整、產物安全、無有毒有害副產物生成、無氨基酸破壞或消旋現象、無環境污染等優勢。

發明內容

本發明的目的在于，提供一種酶法水解蝸牛黏液制備生物活性肽的方法，充分開發利用我國豐富的優質蛋白質資源，通過體外蛋白酶水解技術釋放出具有生物活性的肽類產品，發揮原蛋白質不具備的生理功能。

本發明為實現上述目的所采用的技術方案如下：

一種酶法水解蝸牛黏液制備生物活性肽的方法，該方法為：收集蝸牛黏液，調節蝸牛黏液的pH值為所用蛋白酶的最適pH值，加入蛋白酶，加熱攪拌，進行酶解，酶解結束后進行滅酶處理制得酶解液；將前述制得的酶解液進行脫色、過濾，得到的濾液經濃縮、干燥處理，制得所述生物活性肽產品。具體包括如下步驟：

(1)黏液收集：將蝸牛足部黏液用藥匙刮入容器內，用去離子水沖洗蝸牛足部殘留的黏液，合并液體。

(2)酶解：調節蝸牛黏液的pH值為所用酶的最適pH值，加入酶，并加熱攪拌，進行酶解。酶解結束后，水解液煮沸5-10min滅酶。

(3)脫色：向酶解液中加入活性炭，攪拌脫色。

(4)過濾：使用助濾劑硅藻土預敷過濾介質，將脫色后的酶解液過濾得到無色、透明狀液體。

(5)濃縮：過濾后的液體濃縮去除大部分水分。

(6)干燥：濃縮后的粘稠狀液體經干燥得到粉末狀生物活性肽產品。

步驟(1)所述蝸牛黏液優選白玉蝸牛產生的黏液。