[發(fā)明專利]一種茯苓速生菌種及其制備方法

在審

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• 申請日: 2015-10-20
• 公開（公告）號: CN105385605A
• 公開（公告）日: 2016-03-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖玉林
• 申請（專利權(quán)）人: 肖玉林
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及茯苓菌種生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種茯苓速生菌種的制備方法。

背景技術(shù)

茯苓（學(xué)名：Poriacocos(Schw.)Wolf.）別稱：茯菟，茯靈，茯蕶，伏苓、伏菟，松腴，絳晨伏胎，云苓，茯兔，松薯、松木薯，松苓。藥用部位是多孔菌科真菌茯苓的菌核。具有利水滲濕，健脾，安神的功效。還可以制作成粉狀用來女士愛好的美白面膜。分布區(qū)域：吉林、安徽、浙江、福建、河南、湖北、廣西、四川、貴州、云南。古人稱茯苓為“四時(shí)神藥”，因?yàn)樗πХ浅V泛，不分四季，將它與各種藥物配伍，不管寒、溫、風(fēng)、濕諸疾，都能發(fā)揮其獨(dú)特功效。茯苓味甘、淡、性平，入藥具有利水滲濕、益脾和胃、寧心安神之功用。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究：茯苓能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，茯苓多糖有明顯的抗腫瘤及保肝臟作用。

針對茯苓的良好的醫(yī)療及保健價(jià)值，自古以來，我們的祖先已對其進(jìn)行了許多的開發(fā)應(yīng)用，作為藥品應(yīng)用，它多與其他藥物配伍，眾多藥品、食品研制單位對其進(jìn)行了開發(fā)，目前市場上用作藥品的產(chǎn)品有桂枝茯苓丸、茯苓玉竹片、茯苓山藥片、茯苓多糖原粉、茯苓多糖口服液、茯苓多糖復(fù)方制劑等，作為保健食品有茯苓餅、茯苓膏、螞蟻茯苓酒等。其市場前景十分廣闊。

茯苓的主要成份為β-茯苓聚糖(又稱“茯苓多糖”)，約占干重的93％。茯苓多糖為免疫增強(qiáng)劑，具有增強(qiáng)免疫、輔助化療、防治腫瘤、抗腫瘤等作用，已廣泛用作抗癌新藥、

茯苓為喜溫真菌，適產(chǎn)于中國、東南亞、美洲、大洋洲等有松樹的山區(qū)地方。中國是茯苓主產(chǎn)國，約占世界茯苓總產(chǎn)量的70％。近年來，我國年茯苓成品需求量在2萬噸以上，年出口量約為7000噸，且市場需求量呈現(xiàn)逐年遞增趨勢。但是，國內(nèi)外有關(guān)茯苓新型菌種選育技術(shù)的研究尚顯不足；且菌種經(jīng)多年的繼代繁殖，出現(xiàn)自然變異，品種退化，菌株生命力下降，苓體小，生物學(xué)效率下降，以及存在種植成功率、茯苓產(chǎn)量、茯苓質(zhì)量極低，而且資源緊缺和生產(chǎn)成本高、經(jīng)濟(jì)效益低等問題。因此，選育質(zhì)量更優(yōu)的茯苓新型菌種，提高茯苓種植業(yè)的產(chǎn)量、質(zhì)量和產(chǎn)業(yè)效益，人們當(dāng)前迫切需要解決的是技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問題，一方面本發(fā)明實(shí)施例提供了一種茯苓速生菌種及其制備方法，采用液體發(fā)菌培養(yǎng)、固態(tài)接種栽培，抗雜能力強(qiáng)，適應(yīng)性廣，結(jié)苓率高，有效地縮短了茯苓的生長周期，減少了雜菌的污染和白蟻的危害，具有優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、高抗等優(yōu)點(diǎn)；

另方面本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，茯苓速生菌種的主要性狀特征包括：1)菌種生產(chǎn)周期短，菌絲體粗壯，白色，鎖狀聯(lián)合體明顯；在種植過程中接種方便，菌絲傳引快；2)結(jié)苓早，產(chǎn)量高，苓體均勻結(jié)實(shí)，肉質(zhì)白色，苓皮薄，呈朱色；3)具有遺傳性狀穩(wěn)定、抗雜能力強(qiáng)，質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)；

本發(fā)明的目的在于提供一種茯苓速生菌種的制備方法，包括如下步驟：

1)母種的培養(yǎng)：擇其苓體均勻結(jié)實(shí)、色紅、苓皮薄、香氣濃郁、質(zhì)量好的野生茯苓，在24-28℃條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，在氣溫24℃-26℃，空氣濕度70%-80%時(shí)，用無菌刀拔去茯苓表皮，取一小片實(shí)體，分離菌核菌絲體進(jìn)行培養(yǎng)，得母種；，其中，所述組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基含水量為55-60％，pH值5-6，組成中包括適宜茯苓生長的碳源，所述的碳源選自蔗糖、葡萄糖、氮源選自蛋白胨、氨基酸；

2)菌絲體的提純、復(fù)壯：將母種接種于試管培養(yǎng)基中，置于恒溫箱內(nèi)，26-28℃培養(yǎng)7-10天，至菌絲長滿培養(yǎng)基，擇其生長狀況最優(yōu)者進(jìn)行復(fù)壯培養(yǎng)，

3）所述菌絲體的培養(yǎng)、提純、復(fù)壯培養(yǎng)基的組成為馬鈴薯200g、瓊脂20g、葡萄糖15g、紅糖15g、磷酸二氫鉀1.5g、硫酸鎂0.75g、維生素B11g,,蛋白胨5g、水1000mi（松木屑汁）。其制備方法：包括下述步驟：（1)將馬鈴薯去皮，清選干凈，切成薄片，放入鍋中煮沸，煮到熟而不爛的程度，篩網(wǎng)過濾，制得馬鈴薯汁，調(diào)節(jié)其pH值5.5-6.5；（2)在制得的馬鈴薯汁中加入培養(yǎng)基組成中的其它成份，加熱溶解后，分裝入試管后，在0.15公斤壓力下高溫滅菌30分鐘，取出，冷卻，將其制成斜面培養(yǎng)基。在無菌條件下接入茯苓母種；得提純母種，

4)茯苓速生菌種的選擇：根據(jù)生物基因遺傳、誘導(dǎo)變異、和新品種的選育基本原理，針對性地遴選茯苓速生菌種；其中，所述菌絲體的培養(yǎng)、提純、復(fù)壯的培養(yǎng)基組成為，馬鈴薯200g、瓊脂20g、葡萄糖15g、紅糖15g、磷酸二氫鉀1.5g、硫酸鎂0.75g、維生素B11g,,蛋白胨5g、水1000mi（松木屑汁）。