[發(fā)明專利]檢測(cè)丁草胺的時(shí)間分辨熒光免疫試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510664251.4
• 申請(qǐng)日: 2015-10-15
• 公開（公告）號(hào): CN106596949A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜霞;洪霞;劉靜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京億特生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/577
• 分類號(hào): G01N33/577;G01N33/531;G01N33/533;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測(cè)丁草胺的時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒，其特征在于：由多孔包被板，緩沖液，丁草胺標(biāo)準(zhǔn)品，丁草胺的抗體凍干品，銪標(biāo)記的羊抗鼠抗體，洗滌液和增強(qiáng)液所組成。

2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測(cè)丁草胺的時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒，包括免疫原、包被原和單克隆抗體的制備以及樣品前處理，其特征在于：

(1) 將丁草胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)，得到免疫原；

(2) 將丁草胺與卵血清蛋白偶聯(lián)，得到包被原；

(3) 用步驟(1)的免疫原免疫小鼠，通過雜交瘤技術(shù)，得到分泌抗丁草胺的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株；

(4) 以體內(nèi)誘生腹水法大量制備抗體，使用Protein G柱進(jìn)行純化，獲得抗丁草胺的單克隆抗體

(5) 用步驟(2)的包被原包被固相載體；

(6) 將動(dòng)物組織先經(jīng)過酸解提取后，再過MAX柱凈化，最后加入衍生試劑和催化劑進(jìn)行處理，得到待測(cè)產(chǎn)物；

(7) 將步驟(6)的待檢物進(jìn)行測(cè)量熒光強(qiáng)度cps，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的丁草胺丁草胺含量。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測(cè)丁草胺的時(shí)間熒光免疫分析法試劑盒，其特征在于：所述的固相載體是多孔包被板，采用96孔的多微孔包被板作為固相載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測(cè)丁草胺的時(shí)間熒光分辨免疫分析法試劑盒，其特征在于：所述的衍生試劑是丁胺。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測(cè)丁草胺的時(shí)間分辨熒光免疫分析法試劑盒，其特征在于：所述的催化劑是腈基磷酸二乙酯。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測(cè)丁草胺的時(shí)間熒光免疫分析法試劑盒，其特征在于：所述步驟(6)和(7)具體為取包被有丁草胺-OVA的微孔包被板，加入50 μL處理好的樣品到各自的微孔中，加入50 μL以緩沖液稀釋的丁草胺抗體，25~37℃振蕩0.5~1小時(shí)，洗滌液洗三次，加以緩沖液稀釋的100 μL Eu³⁺-羊抗鼠抗體，25~37℃振蕩0.5~1小時(shí)，洗滌液洗六次，加200 μL增強(qiáng)液振蕩5分鐘后測(cè)量熒光強(qiáng)度cps，從標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的丁草胺含量。