[發明專利]一種檢測酶活性及化學發光反應底物性能的方法

有效

• 申請號: 201510657942.1
• 申請日: 2015-10-12
• 公開（公告）號: CN105277537B
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發明（設計）人: 泮鋒綱;丁俊杰;施啟堯
• 申請（專利權）人: 江蘇三聯生物工程有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76
• 代理公司: 常州市英諾創信專利代理事務所(普通合伙) 32258
• 代理人: 王美華

本發明公開了一種檢測酶活性及化學發光反應底物性能的方法，包括發光杯、化學發光反應底物A、化學反應發光底物B、與所述化學發光反應底物A、化學反應發光底物B相配合檢測的酶溶液、感光設備；所述化學發光反應底物A、化學反應發光底物B與所述酶溶液發光體系的建立，根據所述建立的發光體系檢測所述酶溶液活性或者所述化學發光反應底物的性能。本發明的方法可以快速有效地準確測定多種能引起化學發光現象的酶的活性及濃度，且能夠根據已知濃度的酶溶液快速準確地評價化學發光底物的性能，特別是適用于兩種化學發光底物進行比較。

技術領域

本發明涉及生物分析化學技術領域，具體涉及一種檢測酶活性及化學發光反應底物性能的方法。

背景技術

化學發光是物質在進行化學反應過程中伴隨的一種光輻射現象，其發光機理是反應體系中的某些物質吸收了反應釋放的能量而由基態躍遷至激發態，從激發態返回基態時將能量以光輻射的形式釋放出來，產生發光現象。化學發光分析法則是依據某一時刻化學發光強度或化學發光總量來確定反應中相應組分含量的一種微量及痕量分析法，具有高靈敏度、線性范圍寬、設備簡單、操作簡便、易于實現自動化和分析快速等特點。近年來，與流動注射、電化學、高效液相色譜和毛細管電泳等方法的聯用，使得化學發光分析法已廣泛應用于藥物分析、臨床分析、環境分析和材料分析等領域。化學發光底物研發，選擇，穩定性測試等工作中，都需要有有效的性能評價手段。一般企業都是采用ELISA或者自制試劑盒中試用的方式進行評價。這兩種方法都存在影響因素太多，費時費力，成本高等問題。

酶的濃度和活性(或稱酶活力)是生物學領域中被高度關注的課題，如何快速，準確地測定酶的濃度和活性是實現正確使用酶以及酶制劑的基礎。目前大部分廠家采用的測定方法是電泳法，免疫法，生物法等方法。這些方法普遍存在檢測費用高，周期長，不夠準確等缺點。

發明內容

基于此，有必要提供一種快速，簡便，直接檢測酶活性及化學發光反應底物性能的方法以解決上述技術問題中的至少一種。

一種檢測酶活性及化學發光反應底物性能的方法，包括：發光杯、化學發光反應底物A、化學反應發光底物B、與所述化學發光反應底物A、化學反應發光底物B相配合檢測的酶溶液、感光設備，和所述化學發光反應底物A、化學反應發光底物B與所述酶溶液發光體系的建立，根據所述建立的發光體系檢測所述酶溶液活性或者酶濃度或者所述化學發光反應底物的性能；

所述發光體系的建立包括以下步驟：

1)將所述化學發光反應底物A和化學反應發光底物B按一定比例調制混合均勻，并置于所述發光杯中，備用；

2)將所述酶溶液稀釋至一系列不同的濃度；

3)將步驟2所述稀釋過的酶溶液至于所述發光杯中與所述化學發光反應底物A和化學反應發光底物B的混合液充分混合，并置入所述感光設備中進行光信號強度的測定，得出光信號強度；

4)根據步驟3得到的一系列不同濃度時所述的光信號強度確立所述酶溶液濃度或者與化學發光信號強度之間的線性關系。

進一步的，所述檢測酶溶液活性包括以下步驟：

1)將所述化學發光反應底物A和化學反應發光底物B按一定比例調制混合均勻，并置于所述發光杯中，備用；

2)將所述酶溶液稀釋至一定的濃度；

3)將步驟2所述稀釋過的酶溶液至于所述發光杯中與所述化學發光反應底物A和化學反應發光底物B的混合液充分混合，并置入所述感光設備中進行光信號強度的測定，得出光信號強度X；

4)將步驟3得到的光信號強度X與所述建立的發光體系進行比較，計算所述酶溶液的活性或者濃度或者所述化學發光反應底物的性能。