[發(fā)明專利]桃砧木中桃抗砧1號的組培繁殖技術(shù)

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510653264.1
• 申請日: 2015-10-12
• 公開（公告）號: CN105210870A
• 公開（公告）日: 2016-01-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王新衛(wèi);白曉燕;王力榮;朱更瑞;方偉超;曹珂;陳昌文;郝峰鴿
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.桃砧木中桃抗砧1號的組培繁殖技術(shù)，其特征在于：它包括以下步驟：

1）外植體的采集與預(yù)處理

在桃枝條旺盛生長期，挑選生長旺盛、健康無病蟲害10cm長左右的新梢，去除葉子和頂芽，留下0.2-0.3cm長的葉柄，然后用含有洗潔精的自來水清洗枝條表面的灰塵后，將其剪成含有2個嫩芽的小段；在二溴海因溶液中浸泡20min，然后用流水沖洗1-2h，用于初代培養(yǎng)；

2）無菌苗的建立

在超凈工作臺上，將20個左右的莖段放入500mL的燒杯中，首先加入75%乙醇淹沒實(shí)驗(yàn)材料，緩慢搖晃30s，迅速將乙醇倒出；然后加入0.1%升汞溶液攪拌4min，最后用無菌水沖洗3次，浸泡1次，浸泡時間為5-10min；將材料放在盛有無菌濾紙的培養(yǎng)皿中，吸干材料表面水分，用無菌手術(shù)刀分別切去莖段的基部和頂部0.2cm，然后每個莖段接種在含有初代培養(yǎng)基的試管中進(jìn)行接種培養(yǎng)；

3）增殖培養(yǎng)

組培材料在增殖培養(yǎng)基Ⅰ上增殖2代，再在增殖培養(yǎng)基Ⅱ上增殖1代，隨后再轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基Ⅰ，如此循環(huán)往復(fù)，直到得到所需數(shù)量的無根苗；

4）伸長培養(yǎng)

用手術(shù)刀片將經(jīng)過增殖培養(yǎng)的叢生芽基部切一個新切口，轉(zhuǎn)入伸長培養(yǎng)基培養(yǎng)，當(dāng)這些叢生芽繼續(xù)生長到長度為1.5cm左右時，從主干枝條上切下，接種在伸長培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)3周左右；

5）生根階段

將經(jīng)過伸長培養(yǎng)的無根組培苗基部切一個新切口，剪去基部側(cè)芽和葉片，接種到盛有生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，每個培養(yǎng)瓶中放置3-4個待生根苗；先將培養(yǎng)瓶放在組培間內(nèi)黑暗條件下培養(yǎng)5-7天，再放到組培室的散射光下培養(yǎng)2天，最后回歸到正常組培苗培育的光、溫條件培養(yǎng)2-3周，待根長出后用于煉苗移栽；

6）溫室煉苗移栽

待組培苗生根2-4條，根長1-4cm時，進(jìn)行組培苗煉苗5-7天，在下午16:00-18:00移栽到裝有珍珠巖與腐植土1:1混配的濕潤基質(zhì)的育苗盒中，澆透水，蓋上透明保濕罩，上留1個風(fēng)口，置于濕度60-70%的溫室內(nèi)讓其生長成苗；移栽后不定期進(jìn)行噴水和噴灑殺菌劑殺菌等。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桃砧木中桃抗砧1號的組培繁殖技術(shù)，其特征在于：所述的初代培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH5.7-6.2；所述的初代培養(yǎng)基的培養(yǎng)環(huán)境為溫度22℃-26℃，光照強(qiáng)度為40-45μmol/m²/s，光周期為16h光照/8h黑暗。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桃砧木中桃抗砧1號的組培繁殖技術(shù)，其特征在于：所述的增殖培養(yǎng)的方法為從無污染的初代培養(yǎng)外植體上剪下長度為1cm左右的新生芽，接種到增殖培養(yǎng)基Ⅰ上，培養(yǎng)3-4周；在這一階段，每個莖段將會增殖出多個小苗，繼續(xù)增殖培養(yǎng)時，將這些小苗剪去頂芽，消除頂端優(yōu)勢，繼續(xù)轉(zhuǎn)接到新的增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)，繼代兩代后，然后再轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基Ⅰ；所述的增殖培養(yǎng)基Ⅰ為：MS+6-BA0.7mg/L+IBA0.07mg/L+GA30.05mg/L+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH5.7-6.2；所述的增殖培養(yǎng)基Ⅱ?yàn)镸S+6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH5.7-6.2。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桃砧木中桃抗砧1號的組培繁殖技術(shù)，其特征在于：所述的伸長培養(yǎng)基為：MS+6-BA0.3mg/L+IBA0.1mg/L+GA30.05mg/L+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH5.7-6.2。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桃砧木中桃抗砧1號的組培繁殖技術(shù)，其特征在于：所述的生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA1.0mg/L+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂，pH5.7-6.2。