[發明專利]基于核酸適配體檢測卡那霉素的電化學傳感器及其制備方法在審
| 申請號： | 201510652510.1 | 申請日： | 2015-10-10 |
| 公開（公告）號： | CN105158320A | 公開（公告）日： | 2015-12-16 |
| 發明（設計）人： | 王玉;王虹智;黃加棟;劉素;郭玉娜;許穎;邱婷婷;崔潔;崔雪君;冷雪琪;韓聰;裴倩倩 | 申請（專利權）人： | 濟南大學 |
| 主分類號： | G01N27/48 | 分類號： | G01N27/48 |
| 代理公司： | 濟南泉城專利商標事務所 37218 | 代理人： | 張世靜 |
| 地址： | 250022 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 核酸 體檢 卡那霉素 電化學傳感器 及其 制備 方法 | ||
1.一種基于核酸適配體檢測卡那霉素的電化學傳感器，其特征在于，由以下步驟制備而成：
（1）對電極進行預處理；
（2）將HAP2與Helper的混合液修飾到電極表面；
（3）將均相反應產物層修飾到電極表面；
所述HAP2的核苷酸序列如SEQ:ID:NO:3所示；
所述Helper的核苷酸序列如SEQ:ID:NO:4所示。
2.根據權利要求1所述的電化學傳感器，其特征在于，步驟（2）具體為：將10μL的濃度為10μM的HAP2與Helper的混合液滴加到經過預處理的電極表面，在37℃下孵育2h。
3.根據權利要求1所述的電化學傳感器，其特征在于，步驟（3）具體為：
（1）將滅菌水，10×的buffer緩沖液、10μM的HAP1，10μM的Primer，phi29DNA聚合酶，dNTPs，Nt.AlwI內切酶和待測目標物加入離心管中，震蕩30s，放入37℃的恒溫箱中孵育2h；
（2）將孵育好的混合溶液放在65℃的恒溫箱中孵育5min，使phi29DNA聚合酶與Nt.AlwI內切酶失活；
（3）再與ExoⅢ一同滴加到修飾好HAP2與Helper的混合液的電極上，將電極繼續放在37℃的恒溫箱中孵育2h，清洗；
所述HAP1的核苷酸序列如SEQ:ID:NO:1所示；
所述Primer的核苷酸序列如SEQ:ID:NO:2所示。
4.根據權利要求1所述的電化學傳感器，其特征在于，步驟（1）具體為：電極在0.3和0.05μm的氧化鋁漿中進行拋光處理，直到呈鏡面，用PBS和二次水沖洗。
5.根據權利要求1或4所述的電化學傳感器，其特征在于，所述電極為金電極。
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