[發明專利]一種采用甘蔗渣生產乳酸的方法

有效

• 申請號: 201510636264.0
• 申請日: 2015-09-30
• 公開（公告）號: CN105063110B
• 公開（公告）日: 2018-04-24
• 發明（設計）人: 李市場;王延凱;古紹彬;李曉林;盧嘉琪
• 申請（專利權）人: 河南科技大學
• 主分類號: C12P7/56
• 分類號: C12P7/56;C12P19/14;C12P19/02;C12R1/245;C12R1/07;C12R1/685
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙)41120
• 代理人: 羅民健

1.一種采用甘蔗渣生產乳酸的方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一、甘蔗渣的預處理：將甘蔗渣粉碎至100-200目，備用；用質量分數為0.5%的NaOH溶液對粉碎后的甘蔗渣進行噴灑揉搓，時間為12h，得到預處理后甘蔗渣；操作方法為：噴灑均勻后揉搓5min，放入45℃環境中；每隔4h噴灑NaOH溶液并揉搓一次，每次揉搓5min；

步驟二、在預處理后甘蔗渣中添加蒸餾水調節pH值為4.8，然后加入木聚糖酶和纖維素酶，放入50℃搖床上進行酶解糖化，糖化時間為8h-10h；所述木聚糖酶和纖維素酶的加入量分別為預處理后甘蔗渣質量的0.05%和0.08%；

步驟三、糖化結束后進行過濾，得到過濾酶解液；將得到的過濾酶解液進行濃縮，得到濃縮酶解液；

步驟四、取干酪乳桿菌接種于干酪乳桿菌種子液培養基中進行培養，得到干酪乳桿菌的種子液，備用；取凝結芽孢桿菌接種于凝結芽孢桿菌種子液培養基進行培養，得到凝結芽孢桿菌的種子液，備用；取黑曲霉，接種于黑曲霉種子液培養基中進行培養，得到黑曲霉的種子液；

步驟五、取干酪乳桿菌的種子液接種于發酵培養基中，每升發酵培養基中含步驟三所述濃縮酶解液50ml，干酪乳桿菌種子液接種量為發酵培養基體積的2-2.3%；接著，置于搖床培養發酵，溫度35℃，速率150r/min；發酵24h后，取出，接種凝結芽孢桿菌的種子液，接種量為發酵培養基的1.5-2%；繼續發酵10h后，取出，接種黑曲霉的種子液，接種量為發酵培養基的1.5-2%；然后置于搖床培養發酵，溫度32℃，速率200r/min，發酵時間55h-65h；所得到發酵液進行乳酸含量測定后，進行分離純化，即得到乳酸。

2.如權利要求1所述的采用甘蔗渣生產乳酸的方法，其特征在于：所述過濾酶解液進行濃縮的方法為：在0.09個大氣壓條件下，水浴溫度達到53℃糖化液出現沸騰現象，轉速60-80r/min。

3.如權利要求1所述的采用甘蔗渣生產乳酸的方法，其特征在于：所述干酪乳桿菌的種子培養基，每升培養基中含葡萄糖50g，蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏5g，無水乙酸鈉5g，MgSO₄?7H₂O 20mL，MnSO₄?7H₂O 20mL，碳酸鈣20g，pH6.8和吐溫1mL，余量為水。

4.如權利要求1所述的采用甘蔗渣生產乳酸的方法，其特征在于：所述凝結芽孢桿菌的種子培養基，每升培養基中含葡萄糖80g，(NH₄)₂SO₄ 4g，KH₂PO₄ 0.3g，ZnSO₄?7H₂O 0.44g，MgSO₄?7H₂O 0.25g，余量為水。

5.如權利要求1所述的采用甘蔗渣生產乳酸的方法，其特征在于：所述發酵培養基，每升培養基中含酶解液50ml，蛋白胨10g，酵母膏5g，MgSO₄?7H₂O 0.5g，(NH₄)₂SO₄ 4g，KH₂PO₄ 0.4g，NaCl 0.1g和CaCO₃ 3g，余量為水。

6.如權利要求1所述的采用甘蔗渣生產乳酸的方法，其特征在于：所述發酵液中乳酸含量測定的方法為：采用高效液相色譜進行分析發酵液中乳酸含量，色譜柱為迪馬公司的C18反相，4.6mm×250mm，5μm；流動相為0.01mol/L的磷酸氫二銨溶液，用磷酸調pH值至2.6，經0.45μm孔徑合成纖維素酯膜過濾后，超聲脫氣1h；流速0.8mL/min，檢測波長210nm，進樣量20μL，柱溫為室溫。