[發明專利]一種檢測微生物的方法有效
| 申請號： | 201510632772.1 | 申請日： | 2015-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN105203578B | 公開（公告）日： | 2018-03-09 |
| 發明（設計）人： | 杜美紅;楊寅;代鳳英;張淼 | 申請（專利權）人： | 北京市理化分析測試中心 |
| 主分類號： | G01N24/08 | 分類號： | G01N24/08 |
| 代理公司： | 北京潤平知識產權代理有限公司11283 | 代理人： | 嚴政,李婉婉 |
| 地址： | 100089 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 微生物 方法 | ||
1.一種檢測微生物的方法，其特征在于，該方法由以下步驟組成：
(1)將免疫磁球與液體形式的待測樣品進行混合，得到混合后的物料；混合的條件使得當待測樣品中存在微生物時，免疫磁球能夠特異性地結合所述微生物，所述能夠特異地與微生物結合的免疫磁球由抗體與磁球偶聯得到，所述待測樣品為食品和/或藥品，所述磁球的粒徑為10-80nm；
(2)將所述混合后的物料置于分選磁場中進行磁分離，除去未結合在免疫磁球上的物質；
(3)重懸磁分離得到的沉淀物，并將得到的重懸液進行核磁共振而檢測橫向弛豫時間，根據橫向弛豫時間判斷待測樣品中的微生物的含量；
其中，所述微生物為沙門氏菌(Salmonella)，所述抗體為編號為01-91-99的KPL多克隆抗體；
所述磁球為表面修飾有羧基的聚乙二醇包裹的Fe3O4復合微球和/或表面修飾有羧基的葡聚糖包裹的Fe3O4復合微球。
2.根據權利要求1所述的方法，其中，相對于每克的磁球，所述抗體的用量為10-150mg。
3.根據權利要求1所述的方法，其中，相對于每毫升的液體形式的待測樣品，所述免疫磁球的用量為100-600μg。
4.根據權利要求1所述的方法，其中，所述磁球的粒徑為30-80nm。
5.根據權利要求1所述的方法，其中，步驟(1)中，所述混合的條件包括：溫度為室溫，時間為25-35min。
6.根據權利要求1所述的方法，其中，步驟(2)中，所述磁分離的條件包括：溫度為室溫，時間為25-35min。
7.根據權利要求1所述的方法，其中，步驟(3)中，重懸所用的溶液為磷酸鹽緩沖液，所述磷酸鹽緩沖液含有0.144-0.162mol/L的磷酸氫二鈉和0.038-0.056mol/L的磷酸二氫鈉。
8.根據權利要求1所述的方法，其中，所述微生物為沙門氏菌，所述待測樣品為雞蛋，所述磁球的粒徑為30-80nm。
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