[發明專利]一種蒲公英多糖的提取方法及其應用

在審

• 申請號: 201510631215.8
• 申請日: 2015-09-29
• 公開（公告）號: CN105061631A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發明（設計）人: 張建華
• 申請（專利權）人: 張建華
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P39/06;A23L1/09
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，特別涉及一種蒲公英多糖的提取方法及其應用。

背景技術

蒲公英，性平、味甘、微苦。可清熱解毒，消腫散結。有顯著的催乳作用，治療乳腺炎十分有效。無論煎汁口服，還是搗泥外敷，皆有效驗。此外，蒲公英還有利尿、緩瀉、退黃疸、利膽、助消化，增食欲，治療胃及十二指腸潰瘍，還可防治各種腫瘤。它具有豐富的維生素A、C及礦物質，對消化不良、便秘都有改善的作用。另外葉子還有改善濕疹、舒緩皮膚炎、關節不適的凈血功效，根則具有消炎作用，可以治療膽結石、風濕，花朵煎成藥汁可以去除雀斑，可說是非常有用的一種香藥草。蒲公英植物體中含有蒲公英醇、蒲公英素、膽堿、有機酸、菊糖等多種健康營養成分，有利尿、緩瀉、退黃疸、利膽等功效。蒲公英同時含有蛋白質、脂肪、碳水化合物、微量元素及維生素等，有豐富的營養價值，可生吃、炒食、做湯，是藥食兼用的植物。蒲公英屬植物富含甾醇、棕櫚酸和多糖，多糖是重要的信息分子，具有抗腫瘤、抗病毒、抗衰老、抗輻射、抗突變、降血糖、增強免疫等多方面的作用。

發明內容

為了彌補已有技術的缺陷，本發明的目的是提供一種蒲公英多糖的提取方法及其應用。

一種蒲公英多糖的提取方法，其具體步驟為：

（1）將全草蒲公英洗凈，晾干，45℃烘干，粉碎，過60~100目篩；

（2）取干粉100g，按料液比1:8~12，加入去離子水，95~100℃水浴，回流4~5次，每次1小時，過濾，得提取液；

（3）向提取液中緩慢加入環己酮，邊加入邊攪拌，至加入量為提取液體積的8~12%，1000轉/分鐘，磁力攪拌20~30分鐘，靜置140~160分鐘，10000轉/分鐘，離心10分鐘，取上清，40~45℃真空旋轉蒸發至原體積的1/3，收集環己酮，重復使用；

（4）向3）得到的上清中加入無水乙醇，邊加入邊攪拌，至乙醇體積占總體積的85%，置于4℃冰箱中，靜置過夜，8000轉/分鐘，離心15分鐘，取沉淀；

（5）向4）得到的沉淀中加入3~4倍量的去離子水，真空旋轉濃縮至無乙醇，得粗多糖溶液；

（6）將粗多糖溶液倒入7000道爾頓的透析袋中，將透析袋置于裝滿去離子水的燒杯中，4℃透析36~48小時，更換燒杯中的去離子水3~4次，透析袋可以重復使用；

（7）將透析后的粗多糖溶液以0.5ml/min的速率上樣于DEAE-52纖維素層析柱，依次用1mol/L的NaCl溶液及去離子水洗脫，分管收集，收集液用苯酚-硫酸法檢測多糖含量，繪制洗脫曲線，根據洗脫曲線收集各部位多糖洗脫液，DPPH法測定各部位多糖的抗氧化活性，旋轉蒸發濃縮后真空冷凍干燥；

（8）將經DEAE-52纖維素層析柱初步分離純化的各部位多糖用去離子水配制成5mg/ml的溶液，吸取2ml上樣于SephadexG-100凝膠層析柱，用去離子水進行洗脫，分管收集，收集液用苯酚-硫酸法檢測多糖含量，繪制洗脫曲線，合并糖峰洗脫液，旋轉蒸發濃縮后真空冷凍干燥，得純化蒲公英多糖。

優選地，所述步驟1）將蒲公英粉碎后過80目篩。

優選地，所述步驟2）蒸餾水回流的料液比1:12，100℃水浴，回流5次。

本發明所述的一種蒲公英多糖的應用，是以所述蒲公英多糖作為抗氧化活性成分用于制備保健食品或藥品。

本發明的優點是：

1、本發明提供的一種蒲公英多糖的提取方法及其應用，提取方法簡單，提取率為8.58%，純度為86.3%，用環己酮沉淀蛋白，去除提取液中的蛋白質，去除率高，能夠明顯提高多糖提取液的純度，而且使用量少，節約成本；

2、將蒲公英粉碎后過篩，提高粉碎度，細胞的破碎程度高，提高提取率；用熱水代替乙醇進行回流提取，減少提取液中的脂肪含量，提高多糖的純度，減少后續純化過程，降低成本；

3、利用DEAE-52纖維素層析柱和SephadexG-100凝膠層析柱對粗多糖進行分離純化，不使用有機溶劑，減少純化過程中對多糖的浪費，提高提取率，有利于分管收集，測定不同部位的糖含量及抗氧化活性；

4、蒲公英多糖可作為抗氧化活性成分用于制備保健食品或藥品，抗氧化作用明顯，安全，無副作用，具有很大的市場價值和廣闊的應用前景。

附圖說明

圖1為本發明所述的DEAE-52纖維素層析柱洗脫曲線圖；

圖2為本發明所述的SephadexG-100凝膠層析柱各收集峰的抗氧化活性圖；

圖3為本發明所述的SephadexG-100凝膠層析柱洗脫曲線圖；