[發(fā)明專利]一種蒲公英多糖的提取方法及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510631215.8
• 申請(qǐng)日: 2015-09-29
• 公開（公告）號(hào): CN105061631A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張建華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 張建華
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61K31/715;A61P39/06;A23L1/09
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種蒲公英多糖的提取方法，其特征在于，其具體步驟為：

（1）將全草蒲公英洗凈，晾干，45℃烘干，粉碎，過(guò)60~100目篩；

（2）取蒲公英干粉100g，按料液比1:8~12，加入去離子水，95~100℃水浴，回流4~5次，每次1小時(shí)，過(guò)濾，得提取液；

（3）向提取液中緩慢加入環(huán)己酮，邊加入邊攪拌，至加入量為提取液體積的8~12%，1000轉(zhuǎn)/分鐘，磁力攪拌20~30分鐘，靜置140~160分鐘，10000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清，40~45℃真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積的1/3，收集環(huán)己酮，重復(fù)使用；

（4）向3）得到的上清中加入無(wú)水乙醇，邊加入邊攪拌，至乙醇體積占總體積的85%，置于4℃冰箱中，靜置過(guò)夜，8000轉(zhuǎn)/分鐘，離心15分鐘，取沉淀；

（5）向4）得到的沉淀中加入3~4倍量的去離子水，真空旋轉(zhuǎn)濃縮至無(wú)乙醇，得粗多糖溶液；

（6）將粗多糖溶液倒入7000道爾頓的透析袋中，將透析袋置于裝滿去離子水的燒杯中，4℃透析36~48小時(shí)，更換燒杯中的去離子水3~4次，透析袋可以重復(fù)使用；

（7）將透析后的粗多糖溶液以0.5ml/min的速率上樣于DEAE-52纖維素層析柱，依次用1mol/L的NaCl溶液及去離子水洗脫，分管收集，收集液用苯酚-硫酸法檢測(cè)多糖含量，繪制洗脫曲線，根據(jù)洗脫曲線收集各部位多糖洗脫液，DPPH法測(cè)定各部位多糖的抗氧化活性，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后真空冷凍干燥；

（8）將經(jīng)DEAE-52纖維素層析柱初步分離純化的各部位多糖用去離子水配制成5mg/ml的溶液，吸取2ml上樣于SephadexG-100凝膠層析柱，用去離子水進(jìn)行洗脫，分管收集，收集液用苯酚-硫酸法檢測(cè)多糖含量，繪制洗脫曲線，合并糖峰洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后真空冷凍干燥，得純化蒲公英多糖。

2.如權(quán)利要求1所述的一種蒲公英多糖的提取方法，其特征在于，優(yōu)選地，所述步驟1）將蒲公英粉碎后過(guò)80目篩。

3.如權(quán)利要求1所述的一種蒲公英多糖的提取方法，其特征在于，優(yōu)選地，所述步驟2）蒸餾水回流的料液比1:12，100℃水浴，回流5次。

4.如權(quán)利要求1所述的一種蒲公英多糖的應(yīng)用，其特征在于，以所述蒲公英多糖作為抗氧化活性成分用于制備保健食品或藥品。