[發明專利]一種HLA-B*1502檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201510628748.0
• 申請日: 2015-09-28
• 公開（公告）號: CN105296615A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: 汪大為
• 申請（專利權）人: 北京晉祺生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京國昊天誠知識產權代理有限公司 11315
• 代理人: 劉昕

1.一種HLA-B*1502檢測引物，其特征在于：包括以下引物：

5′-AAATTGTTAAAGGTACTTGGAAAG-3′(SEQIDNo.1，以下簡稱F3)

5′-CATCTAAAGTATACAATTCAATGGTT-3′(SEQIDNo.2，以下簡稱B3)

5′-GCCATGAAGTAAATCCATAAATTTTGAGTTTGTGCCTGTCAAGCTAGGA-3′(SEQIDNo.3，以下簡稱FIP)

5′-AGAGAGACATATTATAAAGCCGTGGATCATATTCAGAGTTTTAAATCTGCA-3′(SEQIDNo.4，以下簡稱BIP)。

2.根據權利要求1所述的HLA-B*1502檢測引物，其特征在于：所述F3、B3、FIP、BIP均為HPLC純化法純化后的引物。

3.一種HLA-B*1502檢測試劑盒，包括用于檢測HLA-B*1502的組合物，所述組合物包括權利要求1或2所述的引物，其特征在于：所述組合物還包括dNTP、緩沖液、Bst聚合酶和超純水。

4.根據權利要求3所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：所述組合物還包括用于顯示組合物顏色的指示劑。

5.根據權利要求4所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：所述指示劑為鈣黃綠素和氯化錳的組合物或者為羥基萘酚藍。

6.根據權利要求3所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：所述組合物還包括甜菜堿或二甲基亞砜中的一種；

其中，甜菜堿的濃度大于0，小于等于1M；

二甲基亞砜的濃度大于0，小于等于10％(體積分數)。

7.根據權利要求6所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：所述甜菜堿的濃度為0.8M。

8.根據權利要求3-6任一所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：所述組合物中，F3和B3均為0.4μM，FIP和BIP均為1.6μM。

9.根據權利要求3-6任一所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：所述緩沖液包括：Tris-HCl20mM，KCl50mM，(NH4)₂SO₄10mM，MgSO₄4mM，Tween-200.1％(體積分數)。

10.根據權利要求5所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：若指示劑為鈣黃綠素和氯化錳的組合物，鈣黃綠素為25μM，氯化錳為0.5mM；

若指示劑為羥基萘酚藍，其為120μM。

11.根據權利要求3-6任一所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：所述組合物中dNTP為1.4mM，Bst聚合酶為8U。

12.一種HLA-B*1502的檢測方法，使用權利要求3-11任一所述的HLA-B*1502檢測試劑盒，其特征在于：將待檢測的核酸加入到所述組合物中，得到的反應體系于55～70℃下反應，反應結束后觀察體系的變化。

13.根據權利要求12所述的HLA-B*1502的檢測方法，其特征在于：所述待檢測的核酸在反應體系中的濃度為0.8～4ng/μL。

14.根據權利要求12或13所述的HLA-B*1502的檢測方法，其特征在于：反應結束后，將反應體系進行滅活處理。

15.根據權利要求12或13所述的HLA-B*1502的檢測方法，其特征在于：反應溫度為58～65℃。

16.根據權利要求12或13所述的HLA-B*1502的檢測方法，其特征在于：反應時間為40～120min。