[發明專利]一種人重組Irisin蛋白及其制備方法和應用在審
| 申請號: | 201510628165.8 | 申請日: | 2015-09-29 |
| 公開(公告)號: | CN105200061A | 公開(公告)日: | 2015-12-30 |
| 發明(設計)人: | 顧志良;何賽;郁建鋒;金澤楷;張燕萍 | 申請(專利權)人: | 常熟理工學院 |
| 主分類號: | C12N15/12 | 分類號: | C12N15/12;C07K14/435;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/17;A61P3/00;C12R1/19 |
| 代理公司: | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王艷 |
| 地址: | 215500 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 重組 irisin 蛋白 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種人Irisin重組蛋白的DNA序列,其堿基序列如SEQIDNO:1所示。
2.一種人Irisin重組蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。
3.含有權利要求1所述的人Irisin重組蛋白的DNA序列的重組表達載體、轉基因細胞系統或轉基因重組菌。
4.根據權利要求3所述的重組表達載體,其特征在于,將權利要求1所述的DNA序列插入到大腸桿菌表達載體中得到的表達人Irisin重組蛋白的DNA的重組表達載體。
5.根據權利要求4所述的重組表達載體,其特征在于,所述大腸桿菌表達載體為pET-30a(+)。
6.一種轉基因重組菌,其特征在于,所述重組菌是將權利要求4或5所述的重組表達載體導入大腸桿菌中,篩選得到轉基因重組菌。
7.權利要求1所述的DNA序列、權利要求3所述的重組表達載體、轉基因細胞系統或轉基因重組菌在生產人Irisin重組蛋白中的應用。
8.一種人Irisin重組蛋白的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)從人肌肉組織中提取總RNA并做反轉錄PCR得到其cDNA,以cDNA為模板,PCR得到人Irisin的基因片段,其堿基序列如SEQIDNO:1所示;
2)構建pET30a-Irisin原核表達載體;
3)構建Rosetta-pET-30a-Irisin原核表達菌株;
4)人Irisin重組蛋白的誘導表達、純化及鑒定。
9.一種權利要求2所述的人Irisin重組蛋白在制備代謝性疾病藥物的應用。
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